 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 生物化學 » 關于使用高壓破碎機提取蛋白
| 查看: 3315 | 回復: 12 | |||
[交流]
關于使用高壓破碎機提取蛋白 已有9人參與
|
|||
|
我是做蛋白原核表達的，誘導表達之后用的是超聲破碎，破碎效果一直不太好，破好幾遍菌液還是很渾，產(chǎn)熱也特別嚴重，而且破一批樣品需要一下午，比較浪費時間。 最近正好隔壁實驗室新買了一臺高壓細胞破碎機UH-06，借用了一下發(fā)現(xiàn)效果還不錯，在這里分享一下心得體會。 我破的是大腸桿菌，使用的時候壓力加到了800 bar，以這個壓力破碎了兩遍樣品就很清澈了，而且跑電泳之后發(fā)現(xiàn)蛋白量也比超聲破碎時高了一些，分析之后認為應該是高壓破碎產(chǎn)熱少，出料溫度比較低，所以對蛋白的影響會小一些。而使用超聲破碎儀破碎之后樣品的溫度通常會很高，放冰浴里效果也不大。 我的樣品量大概有100 mL，在800bar條件下用高壓破碎機破兩遍也只要10分鐘，跟超聲破碎比起來就會節(jié)省很多時間。 總體用下來還是感覺高壓破碎比超聲破碎用起來方便一些。但大部分實驗室現(xiàn)在都用的是超聲破碎，高壓破碎機好像知道的也比較少？ 有其他用過高壓細胞破碎機的大神們也可以交流一下使用心得。 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有283人回復
-
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
Fishsh
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 108.3
- 帖子: 30
- 在線: 1.9小時
- 蟲號: 16128521
- 注冊: 2019-08-22
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
高壓破碎要注意3點:1.壓力都會轉化成熱能，高壓腔瞬間升溫很快，物料流速近1000米/秒的速度，目前科技手段沒有辦法真正實現(xiàn)高壓腔低溫，所以能達到破碎效果時，使用壓力越低產(chǎn)熱越少是最有意義的！千萬別迷信什么品牌壓力多高的參數(shù)！2.高壓時物料中的顆粒物就像子彈打靶一樣，所以機器中破碎閥的材質非常重要，破碎酵母一定要用金剛石，普通硬質合金一下就磨損掉！3.壓力釋放距離越短破碎效果就會越好，所以如果你夠專業(yè)，可以看看閥的邊寬，越小越好，用一段時間看看有沒有磨痕，正常的都是鏡面加工的！ 以上僅供參考 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
9樓2019-10-27 16:42:30
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
|
我本科用過聚能的，體積很大，好處是能用小量，后來用過加拿大ats的，破大腸還可以，體積也小，不過一年要花幾千買那個閥門，破酵母不太行，估計只有百分之三四十的破碎率了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
8樓2019-10-25 21:48:14
MAS_rice
至尊木蟲 (著名寫手)
- 應助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 11486.2
- 散金: 100
- 紅花: 22
- 帖子: 1246
- 在線: 99.6小時
- 蟲號: 3859702
- 注冊: 2015-05-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物營養(yǎng)學
★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰手有余香，分子生物版感謝您的關注與支持。 2019-10-27 23:11:12
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰手有余香，分子生物版感謝您的關注與支持。 2019-10-27 23:11:12
|
請問你的100ml是菌體100ml還是離心后重懸的100ml？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2019-08-26 11:56:58
★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰手有余香，分子生物版感謝您的關注與支持。 2019-10-27 23:11:20
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰手有余香，分子生物版感謝您的關注與支持。 2019-10-27 23:11:20
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
3樓2019-08-26 23:25:55
4樓2019-08-27 08:57:16
5樓2019-09-07 17:47:04
6樓2019-09-16 14:41:45
7樓2019-10-24 16:44:54
clearlove778
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 28.5
- 帖子: 6
- 在線: 1小時
- 蟲號: 21288799
- 注冊: 2020-02-28
- 專業(yè): 臨床分子生物學檢驗
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
|
高壓破碎機的效率比超聲快很多，同樣的樣品做實驗超聲需要45分鐘而且探頭很容易壞，高壓破碎機5分鐘就能達到破碎效果，還是比較喜歡使用的操作也比較簡單 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2020-03-04 10:26:24
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 victor_u 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 2026考研調劑+本科延邊大學+山東大學+生物化學與分子生物學+有項目經(jīng)驗 +3 | ccdsscjy 2026-03-09 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 調劑 +3 | 13853210211 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 312求調劑 +6 | 陌宸希 2026-03-10 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 271求調劑 +10 | 生如夏花… 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 2026考研調劑+本科延邊大學+山東大學+生物化學與分子生物學+有項目經(jīng)驗 +3 | ccdsscjy 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料專碩288分求調劑 一志愿211 +4 | 在家想你 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求材料調劑 085600英一數(shù)二總分302 前三科235 精通機器學習 一志愿哈工大 +4 | 林yaxin 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[文學芳草園] 伙伴們，祝我生日快樂吧 +12 | myrtle 2026-03-10 | 17/850 |
|
|
|
[考研] （081700）化學工程與技術-298分求調劑 +12 | 11啦啦啦 2026-03-11 | 35/1750 |
|
|
|
[考研] 332求調劑 +3 | Zz版 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料工程調劑 +4 | 咪咪空空 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學學碩310找調劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化工學碩306求調劑 +9 | 42838695 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 333求調劑 +3 | 152697 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 2026年博士申請 +3 | QwQwQW10 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 293求調劑，一志愿陜師大生物學 +3 | ??????.?.??? 2026-03-09 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 298求調劑 +3 | Vv呀！ 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0817學碩華東區(qū)求調劑 +3 | 30660438 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300化學求調劑 +5 | 撲風鈴的貓 2026-03-08 | 10/500 |
|
|
|
[考博] 26年博士申請 +4 | 科研狗111 2026-03-07 | 4/200 |
|