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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 生物化學 » 關于使用高壓破碎機提取蛋白
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[交流]
關于使用高壓破碎機提取蛋白 已有9人參與
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我是做蛋白原核表達的，誘導表達之后用的是超聲破碎，破碎效果一直不太好，破好幾遍菌液還是很渾，產熱也特別嚴重，而且破一批樣品需要一下午，比較浪費時間。 最近正好隔壁實驗室新買了一臺高壓細胞破碎機UH-06，借用了一下發(fā)現(xiàn)效果還不錯，在這里分享一下心得體會。 我破的是大腸桿菌，使用的時候壓力加到了800 bar，以這個壓力破碎了兩遍樣品就很清澈了，而且跑電泳之后發(fā)現(xiàn)蛋白量也比超聲破碎時高了一些，分析之后認為應該是高壓破碎產熱少，出料溫度比較低，所以對蛋白的影響會小一些。而使用超聲破碎儀破碎之后樣品的溫度通常會很高，放冰浴里效果也不大。 我的樣品量大概有100 mL，在800bar條件下用高壓破碎機破兩遍也只要10分鐘，跟超聲破碎比起來就會節(jié)省很多時間。 總體用下來還是感覺高壓破碎比超聲破碎用起來方便一些。但大部分實驗室現(xiàn)在都用的是超聲破碎，高壓破碎機好像知道的也比較少？ 有其他用過高壓細胞破碎機的大神們也可以交流一下使用心得。 |
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clearlove778
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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高壓破碎機的效率比超聲快很多，同樣的樣品做實驗超聲需要45分鐘而且探頭很容易壞，高壓破碎機5分鐘就能達到破碎效果，還是比較喜歡使用的操作也比較簡單 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2020-03-04 10:26:24
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