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王一琇新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助做過鏈霉菌接合轉(zhuǎn)移的同學(xué)們呀 已有1人參與
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我用PKC1139質(zhì)粒進(jìn)行屬間接合轉(zhuǎn)移，三個多月了都沒有結(jié)合子生長不知道是什么問題呀。現(xiàn)在在進(jìn)行條件摸索和體系建立。 就是孢子過濾洗脫后40℃，45℃，50℃，55℃這幾個條件熱激10分鐘后，28攝氏度震蕩培養(yǎng)2.4.6小時后，與生長到OD600=0.4-0.5的大腸桿菌1:1混合以后涂在含有20毫摩爾氯化鎂的MS培養(yǎng)基上，放置16.18.20.22小時后涂相應(yīng)萘啶酮酸和安普霉素，抗生素濃度都是做過敏感性實(shí)驗(yàn)的應(yīng)該沒問題，但是一直沒有結(jié)合子生長，是我操作有問題還是這個質(zhì)粒在我的菌體里不實(shí)用呀做過的小伙伴幫我看一下啦 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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4樓2021-08-28 17:09:16
 本帖僅樓主可見 |
2樓2021-08-12 10:50:04
王一琇
新蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
能幫我分析一下具體是什么問題嗎，感覺已經(jīng)找不到能調(diào)試的條件了3樓2021-08-13 10:42:58
若雪心漩
新蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 微生物生態(tài)學(xué)
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先用pset152這種整合型質(zhì)粒摸索條件，提高接合轉(zhuǎn)移條件，再用pkc1139這種可能才能長少量接合子，直接用1139很難 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2021-10-21 11:27:21
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