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王一琇新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助做過(guò)鏈霉菌接合轉(zhuǎn)移的同學(xué)們呀 已有1人參與
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我用PKC1139質(zhì)粒進(jìn)行屬間接合轉(zhuǎn)移，三個(gè)多月了都沒(méi)有結(jié)合子生長(zhǎng)不知道是什么問(wèn)題呀�，F(xiàn)在在進(jìn)行條件摸索和體系建立。 就是孢子過(guò)濾洗脫后40℃，45℃，50℃，55℃這幾個(gè)條件熱激10分鐘后，28攝氏度震蕩培養(yǎng)2.4.6小時(shí)后，與生長(zhǎng)到OD600=0.4-0.5的大腸桿菌1:1混合以后涂在含有20毫摩爾氯化鎂的MS培養(yǎng)基上，放置16.18.20.22小時(shí)后涂相應(yīng)萘啶酮酸和安普霉素，抗生素濃度都是做過(guò)敏感性實(shí)驗(yàn)的應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題，但是一直沒(méi)有結(jié)合子生長(zhǎng)，是我操作有問(wèn)題還是這個(gè)質(zhì)粒在我的菌體里不實(shí)用呀做過(guò)的小伙伴幫我看一下啦 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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王一琇
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 28
- 帖子: 7
- 在線: 2.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 20931641
- 注冊(cè): 2020-02-17
- 專(zhuān)業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
能幫我分析一下具體是什么問(wèn)題嗎，感覺(jué)已經(jīng)找不到能調(diào)試的條件了
3樓2021-08-13 10:42:58
 本帖僅樓主可見(jiàn) |
2樓2021-08-12 10:50:04
4樓2021-08-28 17:09:16
若雪心漩
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 專(zhuān)業(yè): 微生物生態(tài)學(xué)
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先用pset152這種整合型質(zhì)粒摸索條件，提高接合轉(zhuǎn)移條件，再用pkc1139這種可能才能長(zhǎng)少量接合子，直接用1139很難 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
5樓2021-10-21 11:27:21
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