 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1239 | 回復(fù): 5 | ||
[求助]
如何在排除緩沖液干擾的前提下測定蛋白是否含金屬離子
|
| 蛋白存在于緩沖液中（含鈉離子），用ICP法測定的是溶液總的元素含量，不能分辨離子（鈉離子）是不是來自于蛋白質(zhì)，如果用透析的辦法能完全除去緩沖液中的離子嗎，或者冷凍干燥獲得蛋白干粉會不會還帶有溶液中的離子呢？知識有限，求助大家用什么方法可以只測蛋白里面的金屬離子，謝謝各位 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
322分 085600求調(diào)劑，有互聯(lián)網(wǎng)+國金及主持省級大創(chuàng)經(jīng)歷
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
320材料一志愿西工大專碩英二數(shù)二 有兩年光伏工作經(jīng)驗(yàn)
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿鄭州大學(xué)，學(xué)碩，物理化學(xué)， 333求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿中石油，化學(xué)工程，301求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
0703化學(xué)求調(diào)劑，總分320分，一志愿中南民族大學(xué)
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
320材料與化工，求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
一志愿武漢理工大學(xué)-085602-總分296分-求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
286
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
070300化學(xué) 280 一志愿太原理工 求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
085600材料與化工（高分子）290分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
zsygxh
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1110.3
- 散金: 11
- 紅花: 2
- 帖子: 105
- 在線: 56.5小時(shí)
- 蟲號: 2821684
- 注冊: 2013-11-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
| 不了解你所用的方法。想去除鈉離子，冷凍干燥肯定不行，冷凍干燥只能去除水和可揮發(fā)性成分，鈉鹽最后會析出與蛋白干粉共存。透析理論上是無法完全去除某一組分的，但通過多次換液，可以讓某一組分趨近于0（但不等于0），相當(dāng)于稀釋。雖然無法完全去除鈉離子，但仍然可以通過透析達(dá)到你的實(shí)驗(yàn)?zāi)康�。要知道即使多個(gè)蛋白分子與一個(gè)金屬離子形成配位鍵，通常蛋白分子的個(gè)數(shù)也是個(gè)位數(shù)，所以如果你溶液里面的鈉離子的摩爾濃度比蛋白的摩爾濃度低幾個(gè)數(shù)量級，那么假設(shè)是蛋白結(jié)合的鈉離子，檢測得到的鈉離子的量會遠(yuǎn)高于你透析后計(jì)算的理論量。透析盡量多換幾次液。 |
2樓2019-11-11 15:36:24
zsygxh
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1110.3
- 散金: 11
- 紅花: 2
- 帖子: 105
- 在線: 56.5小時(shí)
- 蟲號: 2821684
- 注冊: 2013-11-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2019-11-11 15:38:22
4樓2019-11-11 19:25:42
zsygxh
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1110.3
- 散金: 11
- 紅花: 2
- 帖子: 105
- 在線: 56.5小時(shí)
- 蟲號: 2821684
- 注冊: 2013-11-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
|
超濾離心換液本質(zhì)上跟透析是一樣的，都是降低離子濃度。舉例來講，比如你的蛋白體積10ml，鈉離子濃度100mM,透析到1Lbuffer中，理論濃度變成1mM，再換液透析至1L buffer 中，濃度降至10uM,再換液……4次換液理論上鈉離子濃度稀釋了1億倍（實(shí)際可能達(dá)不到），含量是極低的，如果儀器的靈敏度很高，這種濃度都能檢測到的話，繼續(xù)透析，直至低于儀器可識別范圍。另外，如果蛋白結(jié)合鈉離子，那么會有一個(gè)比例，比如1分子蛋白結(jié)合1分子鈉離子，那么當(dāng)透析到一定濃度后，不管再怎么透析，鈉離子濃度幾乎不再變化，你可以比較不同透析倍數(shù)的鈉離子濃度也能判斷。不推薦超濾離心換液，因?yàn)楹芸赡苡绊懙鞍追�(wěn)定性，發(fā)生聚集。分子篩換液也是一種實(shí)驗(yàn)室規(guī)模常用的方法，脫鹽柱就是一種較粗糙的分子篩，你要求高最好使用純化用的分子篩，用長度高一點(diǎn)的柱子，大分子先出，小分子很晚才出。 |
5樓2019-11-12 12:07:29
6樓2019-11-12 15:05:51
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 Cherishqj 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 320材料一志愿西工大專碩英二數(shù)二 有兩年光伏工作經(jīng)驗(yàn) +3 | 錘某人 2026-03-04 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿鄭州大學(xué)，學(xué)碩，物理化學(xué)， 333求調(diào)劑 +5 | 李魔女斗篷 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 博斯特525 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工，291分，求調(diào)劑 +6 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600材料調(diào)劑 總分330 +3 | 池池丶 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請]
 成果系統(tǒng)訪問量大，請15分鐘后再嘗試。由此給您造成的不便，敬請諒解。
+12
|
xhuama 2026-03-02 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 材料專碩346求調(diào)劑 +3 | 旺一下 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大080500總分324求調(diào)劑 +3 | jorna 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +5 | 學(xué)家科 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 347分電子信息專碩求調(diào)劑 +3 | 咕嘟咕嘟1 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請] 請問大家，研究風(fēng)險(xiǎn)與應(yīng)對措施那里， 大家都怎么寫呢 ？ +3 | cauasen 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085700資環(huán)求調(diào)劑，初始279，六級已過，英語能力強(qiáng) +3 | 085700資環(huán)調(diào)劑 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 280分 +10 | yyqqhh 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 266材料化工求調(diào)劑 +3 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，化學(xué)專業(yè)344分，求調(diào)劑 +6 | 邢xing1 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)085600 319分 材料與化工 金屬方向 求調(diào)劑 +4 | 青科11 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 267求調(diào)劑 +6 | 釣魚佬as 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +3 | cgyzqwn 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856材料求調(diào)劑 +4 | 麻辣魷魚 2026-02-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 亭亭亭01 2026-03-01 | 6/300 |
|