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楊錫369新蟲 (小有名氣)
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[求助]
重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌,菌落PCR假陽性該怎么處理 已有1人參與
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我把重組好的質(zhì)粒從大腸桿菌DH5α中抽提出來(重組質(zhì)粒測序鑒定目的基因已經(jīng)放進(jìn)去了的),然后把抽提的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌感受態(tài),在kan50抗性平板上28℃培養(yǎng)兩天,挑單菌落做菌落PCR,怎么都P不出來。 請問各位小木蟲遇到這種情況該怎么處理?怎么才能提升陽性率,降低假陽性?@gyesang |
新蟲 (小有名氣)
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你的抗生素用錯了。你用的抗生素應(yīng)該是農(nóng)桿菌加重組載體的抗性,而不只是重組載體的抗性 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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農(nóng)桿菌GV 3101的抗性是利福平,還有其他的農(nóng)桿菌,我沒用過不確定,你在用的時候可以搜索一下它對應(yīng)的抗性 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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