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楊錫369新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，菌落PCR假陽(yáng)性該怎么處理 已有1人參與
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我把重組好的質(zhì)粒從大腸桿菌DH5α中抽提出來(lái)（重組質(zhì)粒測(cè)序鑒定目的基因已經(jīng)放進(jìn)去了的），然后把抽提的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌感受態(tài)，在kan50抗性平板上28℃培養(yǎng)兩天，挑單菌落做菌落PCR，怎么都P不出來(lái)。 請(qǐng)問(wèn)各位小木蟲(chóng)遇到這種情況該怎么處理？怎么才能提升陽(yáng)性率，降低假陽(yáng)性？@gyesang |
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雙抗可以用來(lái)檢測(cè)重組載體是否導(dǎo)入進(jìn)農(nóng)桿菌，單抗的即使沒(méi)有轉(zhuǎn)入也可以存活，雙抗跟加保險(xiǎn) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
5樓2019-05-16 13:56:56
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你的抗生素用錯(cuò)了。你用的抗生素應(yīng)該是農(nóng)桿菌加重組載體的抗性，而不只是重組載體的抗性 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
楊錫3692樓2019-05-16 13:05:11
楊錫369
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3樓2019-05-16 13:08:20
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4樓2019-05-16 13:13:01
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