 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 23353 | 回復: 8 | ||
[求助]
Western blot 轉膜使用甲醇問題求教 已有2人參與
|
|
Western blot轉膜液里為什么要加20%甲醇？？我搜索并得到以下解釋，但不確定是否正確： 1、甲醇可以可以減少電流，從而降低產熱。 疑問：直接設置更低的轉膜電壓不就可以了，何必加甲醇。 2、甲醇可以去除蛋白上的SDS 疑問：SDS去除了如何保證蛋白向正極移動。 3、不加甲醇蛋白轉不上膜 疑問：這個說法的原理是什么？我曾用過購買的10× 轉膜液， 直接用水稀釋即可使用，蛋白完全能順利轉上膜，之后也blot出了條帶。 |
回復此樓» 猜你喜歡
推薦一些20種氨基酸檢測的實際應用案例
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經有81人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經有0人回復
-
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經有0人回復
-
納米粒度分析
已經有3人回復
lirol
金蟲 (小有名氣)
- 應助: 16 (小學生)
- 金幣: 1416.1
- 散金: 25
- 紅花: 4
- 帖子: 188
- 在線: 229.2小時
- 蟲號: 2056003
- 注冊: 2012-10-12
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
2樓2019-04-12 08:44:57
匿名
用戶注銷 (正式寫手)
- 應助: 128 (高中生)
- 金幣: 4550.4
- 散金: 50
- 紅花: 22
- 帖子: 934
- 在線: 645.1小時
- 蟲號: 0
- 注冊: 2011-10-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物遺傳學
3樓2019-04-12 08:54:57
4樓2019-04-12 15:46:32
lirol
金蟲 (小有名氣)
- 應助: 16 (小學生)
- 金幣: 1416.1
- 散金: 25
- 紅花: 4
- 帖子: 188
- 在線: 229.2小時
- 蟲號: 2056003
- 注冊: 2012-10-12
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
5樓2019-04-12 16:02:45
|
我找到了其他課題組也用乙醇代替的回答。 我覺得降低電導防止過熱沒有必要用甲醇，畢竟太毒了，不劃算，開始使就用冰的buffer，設置更小的電壓就行了。 也有人表示轉膜不用甲醇是可以的（活化的時候還是要的）。加了甲醇有利于蛋白分子更好的結合到膜上，等等。以下連接給你參考： https://www.researchgate.net/pos ... the_transfer_buffer |
6樓2019-04-12 19:37:02
|
以下是我找到的答案，供大家參考。 https://www.researchgate.net/pos ... the_transfer_buffer 結論是：加了甲醇有利于蛋白的固定到膜上，特別是小分子的蛋白，對于大分子的蛋白可能是不利的，乙醇可以代替甲醇使用。 Thermo fisher官網(wǎng)的說明： Methanol in the transfer buffer aids in stripping the SDS from proteins in SDS-PAGE gels, increasing their ability to bind to support membranes. However, methanol can inactivate enzymes required for downstream analyses, and it can shrink the gel and membrane, which may increase the transfer time of large molecular weight proteins (150,000 Da) with poor solubility in methanol. In the absence of methanol, though, protein gels may swell in low ionic strength buffers, and therefore it is recommended to pre-swell gels for 30 minutes to 1 hour to prevent band distortion. |
7樓2019-04-12 19:41:58
8樓2019-06-10 12:31:09
9樓2024-09-13 19:23:26
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 一個不小心就 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿鄭州大學，學碩，物理化學， 333求調劑 +5 | 李魔女斗篷 2026-03-04 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085600材料與化工 298 調劑 +7 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 本科太原理工采礦工程，求調劑 +3 | onlx 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿314求調劑 +7 | 202111120625 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
[考研] 085601 材料305分求助 +4 | 泡泡郵件 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 中國科學技術大學材料與化工281求調劑，有科研和獲獎經歷 +9 | wsxw 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學 學碩 理工科均可 不區(qū)分研究方向 總分279求調劑 +5 | 1一11 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856材料工程，初試313調劑 +7 | 賣個關子吧 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[碩博家園] 2025屆雙非化工碩士畢業(yè)，申博 +4 | 更多的是 2026-02-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0805總分292，求調劑 +12 | 幻想之殤 2026-03-01 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 調劑 +5 | 13853210211 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工京區(qū)271求調劑 +7 | 11ing 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 298求調劑 +7 | axyz3 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 288求調劑 +3 | 少71.8 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料284求調劑，一志愿鄭州大學英一數(shù)二專碩 +15 | 想上岸的土撥鼠 2026-02-28 | 15/750 |
|
|
|
[考博] 博士自薦 +4 | kkluvs 2026-02-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料調劑 +6 | 愛擦汗的可樂冰 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工299分求調劑 一志愿985落榜 +5 | 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856材料求調劑 +4 | 麻辣魷魚 2026-02-28 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿]
Optics letters投稿被拒求助
 30+3
|
luckyry 2026-02-26 | 4/200 |
|