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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 細胞科學 » 細胞如何在液氮中凍存
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[求助]
細胞如何在液氮中凍存 已有6人參與
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有沒有人可以給我詳細的protocol，如何凍存細胞！在液氮里儲存 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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【答案】應助回帖
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細胞凍存操作流程 操作流程 1. 準備工作，開水浴鍋，預熱試劑，超凈工作臺紫外照射30min 2. 紫外照射后開風機吹10min，酒精擦拭臺面，試劑和所需耗材噴酒精后放入 3. 配置凍存液，如DMEM:FBS  MSO比例為7:2:1或5:4:1，也可選擇全血清凍存液FBSMSO為9:1，將凍存液放入4℃冰箱預冷4. 按照傳代的方法消化細胞，離心，棄上清 5. 加入凍存液重懸細胞，按照1管1ml分裝好后放入程序降溫盒 6. 將程序降溫盒放入-80℃冰箱，過夜后取出，將細胞轉入液氮罐 注意事項 1. 若要計數，可在終止消化后取少量細胞懸液進行計數 2. 凍存液加入到細胞中后，最好半小時內將程序降溫盒轉移到-80℃ 3. 轉入液氮罐前，細胞至少要在-80℃放3h |
7樓2019-01-27 14:37:04
xuelong920
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2樓2019-01-08 22:34:34
w5e5f4
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3樓2019-01-09 08:06:20
w5e5f4
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4樓2019-01-09 08:07:49
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