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o57933933金蟲 (正式寫手)
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[求助]
細(xì)胞如何在液氮中凍存 已有6人參與
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有沒有人可以給我詳細(xì)的protocol，如何凍存細(xì)胞！在液氮里儲存 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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19950515lai
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6樓2019-01-15 15:34:39
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【答案】應(yīng)助回帖
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細(xì)胞凍存操作流程 操作流程 1. 準(zhǔn)備工作，開水浴鍋，預(yù)熱試劑，超凈工作臺紫外照射30min 2. 紫外照射后開風(fēng)機吹10min，酒精擦拭臺面，試劑和所需耗材噴酒精后放入 3. 配置凍存液，如DMEM:FBS  MSO比例為7:2:1或5:4:1，也可選擇全血清凍存液FBSMSO為9:1，將凍存液放入4℃冰箱預(yù)冷4. 按照傳代的方法消化細(xì)胞，離心，棄上清 5. 加入凍存液重懸細(xì)胞，按照1管1ml分裝好后放入程序降溫盒 6. 將程序降溫盒放入-80℃冰箱，過夜后取出，將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐 注意事項 1. 若要計數(shù)，可在終止消化后取少量細(xì)胞懸液進行計數(shù) 2. 凍存液加入到細(xì)胞中后，最好半小時內(nèi)將程序降溫盒轉(zhuǎn)移到-80℃ 3. 轉(zhuǎn)入液氮罐前，細(xì)胞至少要在-80℃放3h |
7樓2019-01-27 14:37:04
xuelong920
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2樓2019-01-08 22:34:34
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3樓2019-01-09 08:06:20
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4樓2019-01-09 08:07:49
5樓2019-01-10 13:12:02
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8樓2019-02-10 16:34:44
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9樓2019-02-12 11:59:56
10樓2019-03-01 14:34:26
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