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o57933933金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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細(xì)胞如何在液氮中凍存 已有6人參與
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有沒(méi)有人可以給我詳細(xì)的protocol,如何凍存細(xì)胞!在液氮里儲(chǔ)存 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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細(xì)胞凍存操作流程 操作流程 1. 準(zhǔn)備工作,開(kāi)水浴鍋,預(yù)熱試劑,超凈工作臺(tái)紫外照射30min 2. 紫外照射后開(kāi)風(fēng)機(jī)吹10min,酒精擦拭臺(tái)面,試劑和所需耗材噴酒精后放入 3. 配置凍存液,如DMEM:FBS MSO比例為7:2:1或5:4:1,也可選擇全血清凍存液FBS MSO為9:1,將凍存液放入4℃冰箱預(yù)冷4. 按照傳代的方法消化細(xì)胞,離心,棄上清 5. 加入凍存液重懸細(xì)胞,按照1管1ml分裝好后放入程序降溫盒 6. 將程序降溫盒放入-80℃冰箱,過(guò)夜后取出,將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐 注意事項(xiàng) 1. 若要計(jì)數(shù),可在終止消化后取少量細(xì)胞懸液進(jìn)行計(jì)數(shù) 2. 凍存液加入到細(xì)胞中后,最好半小時(shí)內(nèi)將程序降溫盒轉(zhuǎn)移到-80℃ 3. 轉(zhuǎn)入液氮罐前,細(xì)胞至少要在-80℃放3h |

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