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細胞如何在液氮中凍存 已有6人參與
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有沒有人可以給我詳細的protocol,如何凍存細胞!在液氮里儲存 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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細胞凍存操作流程 操作流程 1. 準備工作,開水浴鍋,預熱試劑,超凈工作臺紫外照射30min 2. 紫外照射后開風機吹10min,酒精擦拭臺面,試劑和所需耗材噴酒精后放入 3. 配置凍存液,如DMEM:FBS MSO比例為7:2:1或5:4:1,也可選擇全血清凍存液FBS MSO為9:1,將凍存液放入4℃冰箱預冷4. 按照傳代的方法消化細胞,離心,棄上清 5. 加入凍存液重懸細胞,按照1管1ml分裝好后放入程序降溫盒 6. 將程序降溫盒放入-80℃冰箱,過夜后取出,將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐 注意事項 1. 若要計數(shù),可在終止消化后取少量細胞懸液進行計數(shù) 2. 凍存液加入到細胞中后,最好半小時內(nèi)將程序降溫盒轉(zhuǎn)移到-80℃ 3. 轉(zhuǎn)入液氮罐前,細胞至少要在-80℃放3h |

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