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[交流]
蛋白純化儀使用經(jīng)驗交流——大家遇到這些問題了嗎? 已有3人參與
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最近實驗室的蛋白純化儀頻繁出現(xiàn)流速不穩(wěn)定的問題,尤其是純化包涵體時,柱子動不動就堵住,緩沖液換了幾種還是效果不好……想和大家討論幾個常見痛點: 1. 低濃度蛋白回收率低 目標(biāo)蛋白濃度<1mg/mL時,洗脫峰總是不理想,試過調(diào)整上樣量和結(jié)合時間,但收率還是上不去,有沒有優(yōu)化建議? 2. 非特異性結(jié)合嚴(yán)重 特別是粗提液中雜蛋白多的時候,鎳柱/離子柱的背景吸附明顯,大家一般怎么預(yù)處理樣品? 3. 儀器維護(hù)成本 配件(比如泵密封圈、UV燈)更換頻率比預(yù)期高,有沒有延長使用壽命的小技巧? PS:最近試了梯度洗脫延長至5CV,雜帶少了些,但時間成本翻倍了……) |
鐵蟲 (初入文壇)
金蟲 (正式寫手)
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