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[交流]
蛋白純化儀使用經(jīng)驗交流——大家遇到這些問題了嗎？ 已有3人參與
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最近實驗室的蛋白純化儀頻繁出現(xiàn)流速不穩(wěn)定的問題，尤其是純化包涵體時，柱子動不動就堵住，緩沖液換了幾種還是效果不好……想和大家討論幾個常見痛點： 1. 低濃度蛋白回收率低 目標蛋白濃度＜1mg/mL時，洗脫峰總是不理想，試過調(diào)整上樣量和結(jié)合時間，但收率還是上不去，有沒有優(yōu)化建議？ 2. 非特異性結(jié)合嚴重 特別是粗提液中雜蛋白多的時候，鎳柱/離子柱的背景吸附明顯，大家一般怎么預處理樣品？ 3. 儀器維護成本 配件（比如泵密封圈、UV燈）更換頻率比預期高，有沒有延長使用壽命的小技巧？ PS：最近試了梯度洗脫延長至5CV，雜帶少了些，但時間成本翻倍了……） |
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