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[交流]
蛋白純化儀使用經(jīng)驗(yàn)交流——大家遇到這些問題了嗎？ 已有3人參與
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最近實(shí)驗(yàn)室的蛋白純化儀頻繁出現(xiàn)流速不穩(wěn)定的問題，尤其是純化包涵體時(shí)，柱子動(dòng)不動(dòng)就堵住，緩沖液換了幾種還是效果不好……想和大家討論幾個(gè)常見痛點(diǎn)： 1. 低濃度蛋白回收率低 目標(biāo)蛋白濃度＜1mg/mL時(shí)，洗脫峰總是不理想，試過調(diào)整上樣量和結(jié)合時(shí)間，但收率還是上不去，有沒有優(yōu)化建議？ 2. 非特異性結(jié)合嚴(yán)重 特別是粗提液中雜蛋白多的時(shí)候，鎳柱/離子柱的背景吸附明顯，大家一般怎么預(yù)處理樣品？ 3. 儀器維護(hù)成本 配件（比如泵密封圈、UV燈）更換頻率比預(yù)期高，有沒有延長(zhǎng)使用壽命的小技巧？ PS：最近試了梯度洗脫延長(zhǎng)至5CV，雜帶少了些，但時(shí)間成本翻倍了……） |
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