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wsdtxs新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
加熱純化高溫酶,加熱處理后和處理前一點(diǎn)區(qū)別都沒(méi)有 已有1人參與
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| 在大腸桿菌中表達(dá)了一種熱穩(wěn)定蛋白,通過(guò)加熱處理方法沉淀雜蛋白,同樣的操作方法只有一次成功了,剩下每次都是和處理前一點(diǎn)變化都沒(méi)有,有人知道這是怎么回事嗎?已經(jīng)提高了處理溫度還是不行。 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |

新蟲(chóng) (初入文壇)
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生物大分子降解酶
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是這樣的,蛋白質(zhì)變性之后不一定能馬上沉淀,即使最終會(huì)沉淀,也可能需要個(gè)過(guò)程,或者不會(huì)全部沉淀,我對(duì)粗蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行酸變性、堿變性和硫酸銨沉淀處理的時(shí)候會(huì)在4度靜置至少8個(gè)小時(shí)再離心,如果只靜置2小時(shí),那么離心完畢后第二天再離心也還是有沉淀的。所以你熱變性之后會(huì)不會(huì)也在4度靜置過(guò)夜再操作比較好。 |

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