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wsdtxs新蟲 (初入文壇)
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加熱純化高溫酶，加熱處理后和處理前一點(diǎn)區(qū)別都沒有 已有1人參與
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| 在大腸桿菌中表達(dá)了一種熱穩(wěn)定蛋白，通過加熱處理方法沉淀雜蛋白，同樣的操作方法只有一次成功了，剩下每次都是和處理前一點(diǎn)變化都沒有，有人知道這是怎么回事嗎？已經(jīng)提高了處理溫度還是不行。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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是這樣的，蛋白質(zhì)變性之后不一定能馬上沉淀，即使最終會沉淀，也可能需要個(gè)過程，或者不會全部沉淀，我對粗蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行酸變性、堿變性和硫酸銨沉淀處理的時(shí)候會在4度靜置至少8個(gè)小時(shí)再離心，如果只靜置2小時(shí)，那么離心完畢后第二天再離心也還是有沉淀的。所以你熱變性之后會不會也在4度靜置過夜再操作比較好。 |
5樓2024-10-10 16:06:29
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2樓2024-10-05 23:14:57
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3樓2024-10-08 08:36:24
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4樓2024-10-09 20:50:11
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6樓2024-10-14 09:57:58
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