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wsdtxs新蟲 (初入文壇)
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[求助]
加熱純化高溫酶,加熱處理后和處理前一點區(qū)別都沒有 已有1人參與
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| 在大腸桿菌中表達(dá)了一種熱穩(wěn)定蛋白,通過加熱處理方法沉淀雜蛋白,同樣的操作方法只有一次成功了,剩下每次都是和處理前一點變化都沒有,有人知道這是怎么回事嗎?已經(jīng)提高了處理溫度還是不行。 |
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗: +248 |
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是這樣的,蛋白質(zhì)變性之后不一定能馬上沉淀,即使最終會沉淀,也可能需要個過程,或者不會全部沉淀,我對粗蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行酸變性、堿變性和硫酸銨沉淀處理的時候會在4度靜置至少8個小時再離心,如果只靜置2小時,那么離心完畢后第二天再離心也還是有沉淀的。所以你熱變性之后會不會也在4度靜置過夜再操作比較好。 |

專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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新蟲 (初入文壇)
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