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小鼠腎小管上皮細(xì)胞 已有1人參與
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細(xì) 胞 介 紹 該細(xì)胞是 1963 年從 C3H 小鼠腎小管組織分離培養(yǎng)的細(xì)胞,通過(guò) SV40 轉(zhuǎn)化的并且對(duì)SV40 T 抗原呈陽(yáng)性。約2%的細(xì)胞對(duì)SV40 病毒抗原呈陽(yáng)性,但病毒不可恢復(fù)。經(jīng)檢測(cè),鼠痘病毒(鼠痘)呈陰性。所有細(xì)胞顯示2-6個(gè)具有次級(jí)收縮的近端著絲粒染色體和每個(gè)細(xì)胞 1-4個(gè)雙臂染色體。百分之六十的細(xì)胞有一條或多條微小的染色體。 培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備 準(zhǔn)備 MEM(推薦 iCell-0012)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 細(xì) 胞 處 理 1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇: 將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL 完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在 1000RPM 條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中 37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代: 如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 作者:畢合生物 公眾號(hào):畢合生物 |
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