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[求助]
蛋白斷裂或者降解會影響蛋白的濃度么？ 已有2人參與
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如題，各位大神，蛋白濃縮完成后用Bradford進(jìn)行定量。根據(jù)定量結(jié)果取2ug跑膠，但是跑膠出來的條帶大概有三四條，都在目標(biāo)分子量處，且條帶都很細(xì)，跟2ug的BSA條帶對比，感覺目標(biāo)泳道的條帶細(xì)且淺，但是是多條的。 但，之前的純化圖的泳道中只有一條較粗的目的條帶。 以上是背景，現(xiàn)在懷疑是不是定量偏高，導(dǎo)致定量后跑的條帶情況要弱？ 第二點(diǎn)，定量后跑膠條帶出現(xiàn)了多條，懷疑蛋白是不是斷裂或者降解了，若是的話，斷裂或者降解后的蛋白濃度會發(fā)生變化么？（這個(gè)問題是我比較想知道的  ）跪求各位大神的指點(diǎn)  |
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fuyuandj86
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
我要睡覺: 金幣+10, ★★★很有幫助 2022-09-21 15:48:11
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
我要睡覺: 金幣+10, ★★★很有幫助 2022-09-21 15:48:11
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這個(gè)問題要分兩個(gè)方面來說，一個(gè)是蛋白降解會不會影響蛋白的實(shí)際濃度；另一個(gè)是蛋白降解會不會影響濃度的測量。 蛋白降解或者斷裂了當(dāng)然會影響目的蛋白的濃度。如果你說的蛋白指的是總蛋白濃度的話，末端一些片段的被切割不會影響摩爾濃度，但會影響質(zhì)量濃度(mg/ml)。 至于一個(gè)蛋白變成兩段或多段以后和斷裂前，測量的表觀濃度有沒有差別，這取決于測量方法。如果斷裂不是很嚴(yán)重，測量的總蛋白表觀濃度不會有明顯差別。如果嚴(yán)重?cái)嗔�，一般來說用BCA和Bradford法測得的總蛋白表觀濃度會小一些，用UV280測得的表觀濃度不變。 |
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我要睡覺
2樓2022-09-21 14:50:09
3樓2022-09-21 15:37:16
盜我QQ者必下地?/a>
禁蟲 (正式寫手)
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
4樓2025-08-20 11:48:02
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