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陪你淋雨

新蟲 (小有名氣)

[求助] DNS法測淀粉酶和纖維素酶活 求助 已有2人參與

請問有沒有大神有測細菌胞外酶活淀粉酶活和纖維素酶活的具體測定方法  能不能分享一下
之前查驗了文獻 方法都有一點小差異  且這個dns試劑在配置過程中還有很多小問題 不溶解等 希望大神么有測過的分享一下好的經(jīng)驗和方法吧 謝謝
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高健永

鐵蟲 (初入文壇)

【答案】應助回帖

同學,你測了嗎?我也有些問題,我們可以討論一下嗎
2樓2020-12-14 20:08:15
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復旦研究院

鐵蟲 (小有名氣)

【答案】應助回帖

取1mL酶液于試管中,70℃保溫15min,迅速冷卻后,在40℃下預熱15min,然后加入2mL40℃預熱好的1%可溶性淀粉,搖勻后40℃下反應5min,迅速冷卻并加入4mL0.4M氫氧化鈉終止反應,然后取1mL反應液于試管中,加入1mLDNS,沸水浴5min,迅速冷卻,定容至15mL,520nm下測定OD值。
參比:將酶液用氫氧化鈉滅活,然后加入淀粉,其他步驟相同。
空白:利用1mL蒸餾水代替1mL反應液,其他步驟相同。
酶活力單位定義:上述條件下底物在1min催化生產(chǎn)1μmol還原糖的酶量定義為一個酶活力單位U(絕干)。
樣品測試分析隨時木蟲私信我 :)
3樓2020-12-15 16:29:17
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陪你淋雨

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by 高健永 at 2020-12-14 20:08:15
同學,你測了嗎?我也有些問題,我們可以討論一下嗎

可以 我私信你了

發(fā)自小木蟲Android客戶端
4樓2020-12-19 09:57:00
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陪你淋雨

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
3樓: Originally posted by 復旦研究院 at 2020-12-15 16:29:17
取1mL酶液于試管中,70℃保溫15min,迅速冷卻后,在40℃下預熱15min,然后加入2mL40℃預熱好的1%可溶性淀粉,搖勻后40℃下反應5min,迅速冷卻并加入4mL0.4M氫氧化鈉終止反應,然后取1mL反應液于試管中,加入1mLDNS, ...

你好 請問你這個方法的計算方式是什么

發(fā)自小木蟲Android客戶端
5樓2020-12-19 09:57:24
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TerryHLHL

銅蟲 (小有名氣)

測淀粉酶活有更簡便的方法,直接用碘液就可以,如果你還需要的話回復我,我會把詳細的方法貼出來

發(fā)自小木蟲IOS客戶端
6樓2021-01-29 04:02:20
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海韻楠馨

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
6樓: Originally posted by TerryHLHL at 2021-01-29 04:02:20
測淀粉酶活有更簡便的方法,直接用碘液就可以,如果你還需要的話回復我,我會把詳細的方法貼出來

你好,能否分享一下你的實驗方案,謝謝。我最近在測淀粉酶活性抑制率,在DNS上遇到了些問題。DNS染色后發(fā)現(xiàn)吸光度區(qū)別不大,試了很多方法都效果都不好
7樓2021-04-03 16:32:30
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boogieeee

新蟲 (初入文壇)

引用回帖:
6樓: Originally posted by TerryHLHL at 2021-01-29 04:02:20
測淀粉酶活有更簡便的方法,直接用碘液就可以,如果你還需要的話回復我,我會把詳細的方法貼出來

您好,我也遇到了相同的問題,請問能分享一下您的方法嗎?

發(fā)自小木蟲Android客戶端
8樓2021-09-07 19:56:08
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