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[求助]
DNS法測淀粉酶和纖維素酶活 求助 已有2人參與
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請問有沒有大神有測細(xì)菌胞外酶活淀粉酶活和纖維素酶活的具體測定方法 能不能分享一下 之前查驗了文獻(xiàn) 方法都有一點小差異 且這個dns試劑在配置過程中還有很多小問題 不溶解等 希望大神么有測過的分享一下好的經(jīng)驗和方法吧 謝謝 |
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海韻楠馨
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【答案】應(yīng)助回帖
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取1mL酶液于試管中，70℃保溫15min，迅速冷卻后，在40℃下預(yù)熱15min，然后加入2mL40℃預(yù)熱好的1%可溶性淀粉，搖勻后40℃下反應(yīng)5min，迅速冷卻并加入4mL0.4M氫氧化鈉終止反應(yīng)，然后取1mL反應(yīng)液于試管中，加入1mLDNS，沸水浴5min，迅速冷卻，定容至15mL，520nm下測定OD值。 參比：將酶液用氫氧化鈉滅活，然后加入淀粉，其他步驟相同。 空白：利用1mL蒸餾水代替1mL反應(yīng)液，其他步驟相同。 酶活力單位定義：上述條件下底物在1min催化生產(chǎn)1μmol還原糖的酶量定義為一個酶活力單位U（絕干）。 |
3樓2020-12-15 16:29:17
4樓2020-12-19 09:57:00
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