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[求助]
DNS法測淀粉酶和纖維素酶活 求助 已有2人參與
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請問有沒有大神有測細菌胞外酶活淀粉酶活和纖維素酶活的具體測定方法 能不能分享一下 之前查驗了文獻 方法都有一點小差異 且這個dns試劑在配置過程中還有很多小問題 不溶解等 希望大神么有測過的分享一下好的經(jīng)驗和方法吧 謝謝 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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取1mL酶液于試管中，70℃保溫15min，迅速冷卻后，在40℃下預(yù)熱15min，然后加入2mL40℃預(yù)熱好的1%可溶性淀粉，搖勻后40℃下反應(yīng)5min，迅速冷卻并加入4mL0.4M氫氧化鈉終止反應(yīng)，然后取1mL反應(yīng)液于試管中，加入1mLDNS，沸水浴5min，迅速冷卻，定容至15mL，520nm下測定OD值。 參比：將酶液用氫氧化鈉滅活，然后加入淀粉，其他步驟相同。 空白：利用1mL蒸餾水代替1mL反應(yīng)液，其他步驟相同。 酶活力單位定義：上述條件下底物在1min催化生產(chǎn)1μmol還原糖的酶量定義為一個酶活力單位U（絕干）。 |
3樓2020-12-15 16:29:17
4樓2020-12-19 09:57:00
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