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cindyyue19金蟲 (小有名氣)
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[交流]
大腸桿菌蛋白表達(dá)時(shí)用何種方法去除N端甲硫氨酸?
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| 最近想要表達(dá)蛋白,想要去掉N端的甲硫氨酸,請(qǐng)問哪位高手能指導(dǎo)一二? |
新蟲 (知名作家)

專家顧問 (正式寫手)
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專家經(jīng)驗(yàn): +21 |

金蟲 (小有名氣)
| 首位的甲酰甲硫氨酸(fMet)在胞內(nèi)能被部分切除,切除的效率受第二位氨基酸側(cè)鏈的影響較大,不同序列切割率差異比較大。如果你是想要純化一些均一的不含fMet的目的蛋白做實(shí)驗(yàn),而不是用于大量生產(chǎn)的話,建議你在序列前面融合能完全切除的標(biāo)簽,比如在前面融合DDDDK,純化后用腸激酶切除,或者融合sumo標(biāo)簽,用ULP1切除,能得到均一的目的蛋白。 |
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