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| 【有獎(jiǎng)交流】積極回復(fù)本帖子，參與交流，就有機(jī)會分得作者 cindyyue19 的 1 個(gè)金幣 | |||
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cindyyue19金蟲 (小有名氣)
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[交流]
大腸桿菌蛋白表達(dá)時(shí)用何種方法去除N端甲硫氨酸?
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| 最近想要表達(dá)蛋白，想要去掉N端的甲硫氨酸，請問哪位高手能指導(dǎo)一二? |
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zsygxh
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
cindyyue19: 金幣+8 2020-09-22 16:58:31
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
cindyyue19: 金幣+8 2020-09-22 16:58:31
| 首位的甲酰甲硫氨酸(fMet)在胞內(nèi)能被部分切除，切除的效率受第二位氨基酸側(cè)鏈的影響較大，不同序列切割率差異比較大。如果你是想要純化一些均一的不含fMet的目的蛋白做實(shí)驗(yàn)，而不是用于大量生產(chǎn)的話，建議你在序列前面融合能完全切除的標(biāo)簽，比如在前面融合DDDDK，純化后用腸激酶切除，或者融合sumo標(biāo)簽，用ULP1切除，能得到均一的目的蛋白。 |
4樓2020-09-22 13:24:19
mritang
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2樓2020-09-22 07:08:12
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3樓2020-09-22 08:04:34
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5樓2020-09-22 17:11:57
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