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2339773049新蟲 (小有名氣)
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[求助]
pET質(zhì)粒 已有2人參與
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請教一下 有兩個pET32a+重組質(zhì)粒，其中一個人為更換抗生素標簽，這兩個質(zhì)粒在大腸中可以共存嗎？容易丟失嗎？ 謝謝 |
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4樓2020-08-19 15:00:09
donkey2014
木蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 生物化學
2樓2020-08-15 10:07:17
雨獨步
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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3樓2020-08-15 19:52:12
zsygxh
金蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
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理論上不同復制子可以共存，實際以不同抗性施壓也可以正常表達，我以前實驗室有人經(jīng)常這么干。但凡有一個質(zhì)粒丟失，就失去了相應抗性，細菌就會死亡，所以保證抗生素夠量就能保證含雙質(zhì)粒菌體一直擴增下去并表達蛋白。需要注意的是，如果是發(fā)酵罐高密度表達，Amp等β-內(nèi)酰胺類抗生素會被逐漸消耗，相同復制子的質(zhì)粒在細菌擴增傳代過程中就可能會出現(xiàn)逐漸丟失的情況，所以不宜使用，可以使用其它抗性代替。搖瓶低密度表達不存在這個問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2020-08-20 14:10:01
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