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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 發(fā)酵/表達 » pET質粒
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2339773049新蟲 (小有名氣)
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[求助]
pET質粒 已有2人參與
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請教一下 有兩個pET32a+重組質粒，其中一個人為更換抗生素標簽，這兩個質粒在大腸中可以共存嗎？容易丟失嗎？ 謝謝 |
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2樓2020-08-15 10:07:17
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- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
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理論上不同復制子可以共存，實際以不同抗性施壓也可以正常表達，我以前實驗室有人經(jīng)常這么干。但凡有一個質粒丟失，就失去了相應抗性，細菌就會死亡，所以保證抗生素夠量就能保證含雙質粒菌體一直擴增下去并表達蛋白。需要注意的是，如果是發(fā)酵罐高密度表達，Amp等β-內酰胺類抗生素會被逐漸消耗，相同復制子的質粒在細菌擴增傳代過程中就可能會出現(xiàn)逐漸丟失的情況，所以不宜使用，可以使用其它抗性代替。搖瓶低密度表達不存在這個問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2020-08-20 14:10:01
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