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Albert冰辰新蟲 (小有名氣)
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[求助]
分光光度法測菌體濃度 已有3人參與
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請(qǐng)問一下，我培養(yǎng)了一瓶細(xì)菌，需要每天測OD值繪制生長曲線。由于我菌液比較少，為了盡量減少測量OD值時(shí)取用菌液的損失對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，我選擇了每次少量選取、進(jìn)行稀釋后再測定的方法。但我今天嘗試了一下，我將菌液用剛配置好的培養(yǎng)基稀釋了十倍，然后以剛配置好的培養(yǎng)基作為參比，但得出來的OD值很小很�。∮袔讉�(gè)還是負(fù)數(shù)��！請(qǐng)問這是什么原因呢？是因?yàn)榫簼舛忍×藛�？另外，這種稀釋后再測OD的方法，是不是應(yīng)該用培養(yǎng)基去稀釋呢？參比應(yīng)該用培養(yǎng)基嗎？另外，用來稀釋的培養(yǎng)基和作為參比的培養(yǎng)基要不要滅菌呢？還有就是我在測定的時(shí)候，比色皿并沒有潤洗，請(qǐng)問這樣的誤差大嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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3樓2019-06-26 09:33:02
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2樓2019-06-26 07:13:46
小乖兔
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6樓2019-06-26 17:25:43
xinxiyuzhou
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 參比是用培養(yǎng)基調(diào)零。不知道你的比色皿是否是小體積的，我們先前的實(shí)驗(yàn)室專門做生長曲線的比色皿是50-100微升的樣品就可以測量。如果你需要的樣品測量的體積大，可以用50 ml的三角瓶來搖菌 (培養(yǎng)20-30ml的菌液）。參比的培養(yǎng)基和稀釋的瓶培養(yǎng)基都要滅菌的。我們以前做的時(shí)候做不過是加了甲醛對(duì)細(xì)菌進(jìn)行滅活后再測的，測之前渦旋或者吹打混勻。最好不要稀釋吧，尤其是在剛接種時(shí)（lag phase）。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
4樓2019-06-26 15:11:05
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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5樓2019-06-26 16:22:19
Albert冰辰
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7樓2019-07-05 19:43:16
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8樓2019-07-05 19:44:21
Albert冰辰
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送紅花一朵 |
非常感謝您的建議！我們最開始也有考慮用小規(guī)格的比色皿，但擔(dān)心小規(guī)格的比色皿不好清洗，能請(qǐng)問一下你們清洗小規(guī)格的比色皿的具體方法嗎？我們現(xiàn)在用的3.5ml的比色皿，清洗起來都很耗時(shí)間，一個(gè)人測OD，兩個(gè)人清洗都來不及！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2019-07-05 19:47:30
10樓2019-08-11 17:30:46
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