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Albert冰辰新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
分光光度法測(cè)菌體濃度 已有3人參與
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請(qǐng)問(wèn)一下，我培養(yǎng)了一瓶細(xì)菌，需要每天測(cè)OD值繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn)。由于我菌液比較少，為了盡量減少測(cè)量OD值時(shí)取用菌液的損失對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，我選擇了每次少量選取、進(jìn)行稀釋后再測(cè)定的方法。但我今天嘗試了一下，我將菌液用剛配置好的培養(yǎng)基稀釋了十倍，然后以剛配置好的培養(yǎng)基作為參比，但得出來(lái)的OD值很小很��！有幾個(gè)還是負(fù)數(shù)��！請(qǐng)問(wèn)這是什么原因呢？是因?yàn)榫簼舛忍×藛�？另外，這種稀釋后再測(cè)OD的方法，是不是應(yīng)該用培養(yǎng)基去稀釋呢？參比應(yīng)該用培養(yǎng)基嗎？另外，用來(lái)稀釋的培養(yǎng)基和作為參比的培養(yǎng)基要不要滅菌呢？還有就是我在測(cè)定的時(shí)候，比色皿并沒(méi)有潤(rùn)洗，請(qǐng)問(wèn)這樣的誤差大嗎？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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Albert冰辰
新蟲(chóng) (小有名氣)
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- 在線(xiàn): 12.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 15084053
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8樓2019-07-05 19:44:21
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2樓2019-06-26 07:13:46
下一頁(yè)、空白
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2019-06-26 09:33:02
xinxiyuzhou
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 參比是用培養(yǎng)基調(diào)零。不知道你的比色皿是否是小體積的，我們先前的實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)門(mén)做生長(zhǎng)曲線(xiàn)的比色皿是50-100微升的樣品就可以測(cè)量。如果你需要的樣品測(cè)量的體積大，可以用50 ml的三角瓶來(lái)?yè)u菌 (培養(yǎng)20-30ml的菌液）。參比的培養(yǎng)基和稀釋的瓶培養(yǎng)基都要滅菌的。我們以前做的時(shí)候做不過(guò)是加了甲醛對(duì)細(xì)菌進(jìn)行滅活后再測(cè)的，測(cè)之前渦旋或者吹打混勻。最好不要稀釋吧，尤其是在剛接種時(shí)（lag phase）。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
Albert冰辰4樓2019-06-26 15:11:05
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