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Albert冰辰新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
分光光度法測(cè)菌體濃度 已有3人參與
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請(qǐng)問(wèn)一下,我培養(yǎng)了一瓶細(xì)菌,需要每天測(cè)OD值繪制生長(zhǎng)曲線。由于我菌液比較少,為了盡量減少測(cè)量OD值時(shí)取用菌液的損失對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾,我選擇了每次少量選取、進(jìn)行稀釋后再測(cè)定的方法。但我今天嘗試了一下,我將菌液用剛配置好的培養(yǎng)基稀釋了十倍,然后以剛配置好的培養(yǎng)基作為參比,但得出來(lái)的OD值很小很!有幾個(gè)還是負(fù)數(shù)!請(qǐng)問(wèn)這是什么原因呢?是因?yàn)榫簼舛忍×藛?另外,這種稀釋后再測(cè)OD的方法,是不是應(yīng)該用培養(yǎng)基去稀釋呢?參比應(yīng)該用培養(yǎng)基嗎?另外,用來(lái)稀釋的培養(yǎng)基和作為參比的培養(yǎng)基要不要滅菌呢?還有就是我在測(cè)定的時(shí)候,比色皿并沒(méi)有潤(rùn)洗,請(qǐng)問(wèn)這樣的誤差大嗎? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
| 參比是用培養(yǎng)基調(diào)零。不知道你的比色皿是否是小體積的,我們先前的實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)門(mén)做生長(zhǎng)曲線的比色皿是50-100微升的樣品就可以測(cè)量。如果你需要的樣品測(cè)量的體積大,可以用50 ml的三角瓶來(lái)?yè)u菌 (培養(yǎng)20-30ml的菌液)。參比的培養(yǎng)基和稀釋的瓶培養(yǎng)基都要滅菌的。我們以前做的時(shí)候做不過(guò)是加了甲醛對(duì)細(xì)菌進(jìn)行滅活后再測(cè)的,測(cè)之前渦旋或者吹打混勻。最好不要稀釋吧,尤其是在剛接種時(shí)(lag phase)。 |
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