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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 動植物 » 實驗技術 » 逆轉錄相關
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[交流]
逆轉錄相關
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| 只知道有實時熒光定量PCR，不知道逆轉錄PCR是怎么一回事，是先逆轉錄后再做實時熒光定量PCR嗎？可是如果是這樣，要怎么確定樣本中的mRNA中的含量呀？怎么轉換一下呢？沒有做過逆轉錄，請指教！ |
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aq7068
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反轉錄，是在隨機引物或特異的引物的引導下反轉錄酶沿著mRNA單鏈合成互補的cDNA序列 熒光Pcr用的酶只能以DNA鏈為模版延伸擴增 也可以用一部法將兩個酶加在一個反應管，但是會影響到擴增效率。 mRNA的表達量可以用絕對定量和相對定量測得 相對定量需要內參，絕對定量需要標準品做標準曲線  發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2019-05-22 20:04:09
去大西南
新蟲 (初入文壇)
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總RNA提完后先測濃度，根據濃度把RNA定量到1μg，然后去除基因組DNA，接著逆轉錄成cDNA，最后才是熒光定量PCR 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2019-05-23 10:08:24
4樓2019-12-23 10:34:55
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