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1073268128新蟲 (小有名氣)
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一般來說，先將粉末用超純水或者稀醋酸（0.1%）將多肽溶解到一個(gè)超高濃度下作為儲存溶液，而不是直接配置到檢測濃度。等需要用的時(shí)候再把這個(gè)儲備溶液用緩沖Buffer配置到需要濃度。不能直接用Buffer緩沖液來溶解多肽，因?yàn)楹芏嚯脑诟啕}濃度下溶解度是下降的，如果出現(xiàn)不溶情況，去除這些鹽和有機(jī)試劑是很困難的一件事。如果多肽溶解過程中出現(xiàn)可見顆粒始終無法分散到水相中，可以用超聲的助溶，但不能起到改善溶解性的效果。 其次，溶解前先審視一下多肽序列，如果多肽中氨基酸（Ala,Phe,Ile,Leu,Met,Pro,Val,Trp,Tyr,Cys）占比高，基本上這條肽比較難溶的。另外還要計(jì)算序列中含有多少正價(jià)基團(tuán)（Lys,Arg,His和N端）和負(fù)價(jià)基團(tuán)（Asp,Glu和C端），在中性條件下，最后的凈價(jià)是正是負(fù)？價(jià)態(tài)為正，在溶解時(shí)用稀醋酸調(diào)節(jié)pH到酸性，價(jià)態(tài)為負(fù)，溶解時(shí)可以用稀氨水調(diào)節(jié)pH到堿性。 如果序列中任何pH下基本不帶電荷，或者序列中疏水性氨基酸個(gè)數(shù)超過50%，可以考慮加入少量乙腈，乙醇，DMSO來溶解。如果已知一條肽在水相中溶解不是很好，而最終使用必須在水相，可以考慮全部使用醋酸或者DMF,DMSO溶解，然后緩慢加水稀釋，這樣有機(jī)溶劑有助于多肽分散到水相中。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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