 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 419 | 回復(fù): 0 | |||
畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
|
[交流]
細(xì)胞培養(yǎng)“翻車”？這些常見錯(cuò)誤別再犯啦！
|
|
細(xì)胞培養(yǎng)可是實(shí)驗(yàn)室里的“精細(xì)活”，稍不注意就容易“翻車”。那些常見的細(xì)胞培養(yǎng)操作錯(cuò)誤，讓你的細(xì)胞健康又茁壯！ 1️⃣ PART.01 復(fù)蘇后細(xì)胞漂浮 01 細(xì)胞本身貼壁能力較弱 以細(xì)胞轉(zhuǎn)染的明星細(xì)胞293T為例，它生長(zhǎng)較快，但貼壁能力弱，容易出現(xiàn)成片脫落。解決辦法是提前用明膠包被板子，增強(qiáng)吸附性，還可以使用TC處理的培養(yǎng)瓶/皿促進(jìn)細(xì)胞貼壁。 02 培養(yǎng)條件不適合 293T細(xì)胞推薦使用DMEM（高糖）+10%FBS培養(yǎng)基，如果用錯(cuò)培養(yǎng)基，細(xì)胞可能生長(zhǎng)不良甚至漂浮。解決辦法是參照細(xì)胞使用說(shuō)明書或?qū)嶒?yàn)室預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選用合適的培養(yǎng)體系。 03 復(fù)蘇過程中操作不當(dāng) 復(fù)蘇時(shí)水溫太低或太高都會(huì)損傷細(xì)胞。正確方法是從液氮罐中取出凍存管，立即放入37℃水槽中快速解凍，搖晃凍存管，確保1分鐘內(nèi)完成解凍。 04 去除凍存液中殘留的DMSO過程，離心對(duì)細(xì)胞造成損傷 為防止DMSO毒性，很多小伙伴會(huì)離心去除上清，但這會(huì)損傷脆弱的細(xì)胞。解決辦法是解凍后直接接種在培養(yǎng)皿內(nèi)，隔天再換新鮮培養(yǎng)基去除DMSO。 2️⃣ PART.02 傳代后細(xì)胞漂浮較多 01 胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng) 不同貼壁細(xì)胞的黏附能力不同，293T細(xì)胞消化時(shí)間為2-3分鐘，A549細(xì)胞系則為5-6分鐘。解決辦法是縮短胰酶消化時(shí)間，以顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓為標(biāo)準(zhǔn)。 02 過度吹打細(xì)胞帶來(lái)機(jī)械損傷 吹打細(xì)胞時(shí)間過長(zhǎng)或用力過度會(huì)帶來(lái)機(jī)械應(yīng)力。解決辦法是胰酶使用前復(fù)溫，以顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓為標(biāo)準(zhǔn)，減少吹打次數(shù)和時(shí)間。 03 培養(yǎng)條件不適合 同PART.01 “細(xì)胞漂浮”問題解答。 04 細(xì)胞接種密度過高 細(xì)胞多，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分不足。解決辦法是細(xì)胞重懸均勻，推薦1:3或1:4的比例傳代，接種后水平均勻晃動(dòng)培養(yǎng)皿，保證細(xì)胞均勻分布。 3️⃣ PART.03 細(xì)胞生長(zhǎng)太慢 01 細(xì)胞接種密度過低 細(xì)胞數(shù)量少，營(yíng)養(yǎng)成分充足但生長(zhǎng)慢。解決辦法是根據(jù)細(xì)胞數(shù)量調(diào)整傳代比例，適當(dāng)增加接種細(xì)胞的初始濃度。 02 培養(yǎng)基配置/使用/保存不當(dāng) 培養(yǎng)基在室溫放置過久或血清批次問題會(huì)導(dǎo)致效能下降。解決辦法是注意各組分保存溫度及性狀是否正常，使用效能穩(wěn)定的血清。 畢合生物提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿北京化工大學(xué)材料與化工296分求調(diào)劑
已經(jīng)有17人回復(fù)
-
0703化學(xué)一志愿211 總分320求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
0703求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
（081700）化學(xué)工程與技術(shù)-298分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿天津大學(xué)材料與化工275求調(diào)劑
已經(jīng)有22人回復(fù)
-
0857 資源與環(huán)境 285分
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
材料工程,326分，求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
301求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
334求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料與化工085600調(diào)劑求老師收留
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 畢合生物2024 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-11 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 泣血叩求調(diào)劑恩，愿以丹心報(bào)師恩 +5 | Iuruoh 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +3 | 搗蛋豬豬 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)數(shù)一英一306求調(diào)劑 +3 | intankt 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿長(zhǎng)安大學(xué)材料與化工309分請(qǐng)求調(diào)劑 +6 | dtdxzxx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 320求調(diào)劑 +4 | 魏zy 2026-03-08 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +5 | Trying] 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +4 | xxxcm 2026-03-08 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +11 | 朝天椒的雙馬尾 2026-03-05 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +4 | 浮云滿足 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 進(jìn)入個(gè)人成果庫(kù)好難，一下午都沒進(jìn)去 +6 | mi_dilee 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +7 | ounce. 2026-03-05 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，不管什么專業(yè)，我是可塑造的人才一枚，希望遇到知己老師撈撈我 +4 | 13102137290 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0307化學(xué)求調(diào)劑 +6 | 0ok0k 2026-03-07 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 誠(chéng)求調(diào)劑，323分 有專利/科研/實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +6 | 橙子cyx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 呼呼？~+123456 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 哈爾濱理工大學(xué)2026年研究生調(diào)劑，材料科學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院研究生調(diào)劑 +3 | xinliu866 2026-03-06 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 不限學(xué)校專業(yè)的調(diào)劑同學(xué)看過來(lái) +5 | 啊擺啊擺 2026-03-05 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 化工282求調(diào)劑一志愿211 +5 | NA0912 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +5 | ws 上岸鴨 2026-03-05 | 5/250 |
|