 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (689)
- >導(dǎo)師招生 (76)
- >考研 (63)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (57)
- >考博 (27)
- >論文投稿 (7)
- >博后之家 (6)
- >基金申請(qǐng) (6)
- >碩博家園 (5)
- >休閑灌水 (5)
- >招聘信息布告欄 (4)
- >教師之家 (4)
- >醫(yī)學(xué) (4)
- >文獻(xiàn)求助 (2)
- >科研資料 (1)
- >微米和納米 (1)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 773 | 回復(fù): 0 | |||
畢合生物2024銅蟲(chóng) (小有名氣)
|
[交流]
細(xì)胞培養(yǎng)小技巧：如何讓細(xì)胞“變漂亮”？
|
|
做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，是不是經(jīng)常遇到細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則、狀態(tài)差，甚至傳代后細(xì)胞越來(lái)越“丑”的問(wèn)題？別擔(dān)心，今天就來(lái)給大家分享幾個(gè)讓細(xì)胞“變漂亮”的小技巧！ 一、細(xì)胞也有“脾氣”，環(huán)境很重要！ 細(xì)胞就像小朋友，不同的細(xì)胞有不同的“脾氣”，它們喜歡的環(huán)境也各不相同。有些細(xì)胞喜歡“熱鬧”，比如內(nèi)皮細(xì)胞，數(shù)量多一點(diǎn)時(shí)生長(zhǎng)得更好；而有些細(xì)胞喜歡“清靜”，比如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞，數(shù)量少一點(diǎn)狀態(tài)反而更好。巨噬細(xì)胞生長(zhǎng)速度超快，貼壁也快，傳代時(shí)要留很少量細(xì)胞，不然細(xì)胞形態(tài)就會(huì)變差。所以，寶子們?cè)陴B(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候，一定要摸清楚它們的“脾氣”，找到合適的生長(zhǎng)空間密度哦！ 二、細(xì)胞狀態(tài)不好？來(lái)個(gè)“美容SPA”！ 如果細(xì)胞形態(tài)不好，或者看起來(lái)有點(diǎn)“臟”，別急，可以給它們做個(gè)“美容SPA”！對(duì)于貼壁細(xì)胞，可以試試下面的方法： 第一步：清洗 倒掉舊培養(yǎng)基，加入3ml PBS輕輕洗滌一次，再用滴管吸走。然后再加入3ml PBS預(yù)吹打一次，輕輕沿著瓶底吹一遍，吸走。這一步就像是給細(xì)胞“洗臉”，把表面的雜質(zhì)清理干凈。 第二步：正式消化 開(kāi)始正式的消化和吹打。把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入新的培養(yǎng)瓶，事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。記得按時(shí)觀察細(xì)胞貼壁情況，10分鐘、20分鐘、30分鐘各觀察一次。等到部分細(xì)胞貼壁后，迅速倒出培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基輕輕洗一次。這一步就像是給細(xì)胞“敷面膜”，讓它們更好地適應(yīng)新環(huán)境。 第三步：后續(xù)培養(yǎng) 加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。如果一次效果不理想，可以重復(fù)多次，直到細(xì)胞形態(tài)完美。記得結(jié)合細(xì)胞的“脾氣”，對(duì)于有密度依賴(lài)性的細(xì)胞，等貼壁細(xì)胞多一點(diǎn)再傳代；反之則少一點(diǎn)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞，如果有很多死細(xì)胞或細(xì)胞碎片，可以用離心法分離。吹散細(xì)胞后用離心管收集，離心后活細(xì)胞在上層，死細(xì)胞和碎片在下層。去掉上清，加入新鮮培養(yǎng)基輕輕吹打上層細(xì)胞，然后接種到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)。這樣就能把“壞細(xì)胞”清理掉，讓“好細(xì)胞”繼續(xù)生長(zhǎng)啦！ 三、傳代消化：細(xì)胞的“生死考驗(yàn)”！ 傳代消化是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵步驟，也是細(xì)胞狀態(tài)變差的常見(jiàn)原因。每次消化都像是對(duì)細(xì)胞的一次“生死考驗(yàn)”，如果操作不當(dāng)，細(xì)胞就會(huì)受到損傷，越長(zhǎng)越差。為了避免這種情況，可以試試“四步消化法”： 第一步：清洗 倒掉舊培養(yǎng)基，加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍，把漂浮的死細(xì)胞洗掉。這是“前奏”，目的是清理雜質(zhì)。 第二步：吹打 加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，把貼壁不牢固的細(xì)胞吹下來(lái)，再用培養(yǎng)基清洗一遍。兩次所得懸液混合傳入新瓶。這一步可以觀察細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度。 第三步：胰酶消化 吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入2ml PBS潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之。再加入1ml左右的胰酶消化。顯微鏡下觀察，待細(xì)胞間隙明顯時(shí)，立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打2-3遍，懸液傳入新瓶。這一步可以最大程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)狀態(tài)。 第四步：繼續(xù)消化 把第三步吸出來(lái)的胰酶重新加入瓶?jī)?nèi)，繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。顯微鏡下觀察，待細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)時(shí)，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打，懸液傳入新瓶培養(yǎng)。這一步可以確保所有細(xì)胞都被均勻處理。 四、總結(jié)：耐心和技巧，讓細(xì)胞“變漂亮”！ 細(xì)胞培養(yǎng)雖然有點(diǎn)復(fù)雜，但只要用心，就能讓細(xì)胞“變漂亮”。不同的細(xì)胞有不同的“脾氣”，要找到合適的生長(zhǎng)環(huán)境；細(xì)胞狀態(tài)不好時(shí)，可以給它們做個(gè)“美容SPA”；傳代消化時(shí)，要小心操作，避免損傷細(xì)胞。只要掌握了這些技巧，細(xì)胞就會(huì)乖乖地生長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)也會(huì)更順利！ 畢合生物提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
新疆大學(xué)地質(zhì)與礦業(yè)工程學(xué)院招生
已經(jīng)有32人回復(fù)
-
0856材料與化工353分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
282分材料專(zhuān)業(yè)求調(diào)劑院校
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
315食品工程求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
環(huán)境調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
接受26屆調(diào)劑生
已經(jīng)有20人回復(fù)
-
考研材料與化工，求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
歡迎211本科同學(xué)，過(guò)A區(qū)國(guó)家線(xiàn)，A區(qū)非偏遠(yuǎn)一本，交叉學(xué)科課題組
已經(jīng)有35人回復(fù)
-
304求調(diào)劑（085602一志愿985）
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
294 英二數(shù)二物化 求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 畢合生物2024 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +4 | 上班不著吉 2026-03-09 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[碩博家園] 2026級(jí)碩士研究生招生/調(diào)劑 +3 | 知足常樂(lè)的樂(lè) 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +6 | 小奶蒼 2026-03-07 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)，英一數(shù)二305分求調(diào)劑，四六級(jí)已過(guò) +5 | 小小番的茄 2026-03-09 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 學(xué)碩 理工科均可 不區(qū)分研究方向 總分279求調(diào)劑 +9 | 1一11 2026-03-03 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿江南大學(xué)，食品科學(xué)與工程，總分，320 +3 | yyyyyukino 2026-03-07 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0701-322 求調(diào)劑 +3 | jiliuxian 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 招調(diào)劑 +20 | 帆船哥 2026-03-04 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | Gale1314 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)專(zhuān)業(yè)調(diào)劑 +5 | 好好好1233 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 不限學(xué)校專(zhuān)業(yè)的調(diào)劑同學(xué)看過(guò)來(lái) +5 | 啊擺啊擺 2026-03-05 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 080500材料科學(xué)與工程 +13 | 202114020319 2026-03-03 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 267調(diào)劑求助 +5 | 聰少OZ 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 320材料一志愿西工大專(zhuān)碩英二數(shù)二 有兩年光伏工作經(jīng)驗(yàn) +5 | 錘某人 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0856材料專(zhuān)碩274能調(diào)劑去哪里？ +3 | 22735 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 成績(jī)276，專(zhuān)業(yè)代碼0856求調(diào)劑 +10 | 小陳朵 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 一志愿東北大學(xué) 279分求調(diào)劑 +4 | 聶樂(lè)平 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +4 | 是樂(lè)渝哇 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +7 | 張張張張oo 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑一志愿中海洋 +3 | lour. 2026-03-03 | 3/150 |
|