 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1248 | 回復(fù): 0 | |||
Abbkine亞科因新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
活/死細(xì)胞雙染色試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
|
|
活 / 死細(xì)胞雙染色試劑盒通常利用兩種不同的熒光染料，基于細(xì)胞的細(xì)胞膜完整性等特性來區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞，以下是其常見的實(shí)驗(yàn)原理： 基于細(xì)胞膜完整性差異 活細(xì)胞染色原理：活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有完整的選擇性通透屏障功能。一些熒光染料，如 Calcein-AM，本身無熒光且為親脂性，能夠自由穿過完整的細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。進(jìn)入細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)的酯酶會(huì)將 Calcein-AM 水解，去除 AM 基團(tuán)，生成具有綠色熒光的 Calcein。由于活細(xì)胞內(nèi)有豐富的酯酶且細(xì)胞膜完整，水解后的 Calcein 無法透出細(xì)胞膜，會(huì)在細(xì)胞內(nèi)積累，從而使活細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。 死細(xì)胞染色原理：死細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變，失去了選擇性通透能力。例如碘化丙啶（PI）等染料，在正常情況下不能透過活細(xì)胞的細(xì)胞膜，但可以自由進(jìn)入死細(xì)胞。PI 能與細(xì)胞內(nèi)的核酸（主要是 DNA）結(jié)合，在激發(fā)光的作用下發(fā)出紅色熒光，從而使死細(xì)胞被染成紅色。 基于細(xì)胞內(nèi)酶活性差異 活細(xì)胞染色原理：一些試劑盒利用活細(xì)胞內(nèi)特有的酶活性來標(biāo)記活細(xì)胞。比如熒光素二乙酸酯（FDA），它可被活細(xì)胞內(nèi)的非特異性酯酶水解，產(chǎn)生具有熒光的熒光素，使活細(xì)胞發(fā)出熒光�；罴�(xì)胞內(nèi)的這種酶活性較高，能夠快速將 FDA 轉(zhuǎn)化為有熒光的產(chǎn)物，從而實(shí)現(xiàn)對活細(xì)胞的特異性染色。 死細(xì)胞染色原理：與活細(xì)胞不同，死細(xì)胞由于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞，細(xì)胞內(nèi)的酶活性會(huì)發(fā)生顯著變化甚至喪失。在利用酶活性差異進(jìn)行染色的體系中，死細(xì)胞無法像活細(xì)胞那樣對相應(yīng)的熒光底物進(jìn)行有效代謝轉(zhuǎn)化，也就無法產(chǎn)生或只能產(chǎn)生極微弱的熒光信號(hào)，從而與活細(xì)胞區(qū)分開來。 基于線粒體膜電位差異 活細(xì)胞染色原理：活細(xì)胞的線粒體具有正常的膜電位，一些陽離子熒光染料，如 JC-1，在進(jìn)入活細(xì)胞后，會(huì)由于線粒體膜電位的存在而聚集在線粒體基質(zhì)中，形成聚合物，這些聚合物能夠發(fā)出紅色熒光。所以，具有正常線粒體膜電位的活細(xì)胞會(huì)顯示紅色熒光。 死細(xì)胞染色原理：當(dāng)細(xì)胞死亡時(shí)，線粒體膜電位會(huì)去極化，喪失正常的電位差。此時(shí)，JC-1 不能聚集在線粒體中形成聚合物，而是以單體形式存在于細(xì)胞內(nèi)，單體的 JC-1 發(fā)出綠色熒光。因此，死細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)綠色熒光，以此與活細(xì)胞相區(qū)別。 分享 活/死細(xì)胞雙染色試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟 活/死細(xì)胞雙染色試劑盒的儲(chǔ)存條件和有效期是多久？ 活/死細(xì)胞雙染色試劑盒可以用于哪些細(xì)胞類型的染色？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
2026級碩士研究生招生/調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
0703化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
新疆大學(xué)地質(zhì)與礦業(yè)工程學(xué)院招生
已經(jīng)有32人回復(fù)
-
0856材料與化工353分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
282分材料專業(yè)求調(diào)劑院校
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
315食品工程求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
環(huán)境調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
接受26屆調(diào)劑生
已經(jīng)有20人回復(fù)
-
考研材料與化工，求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
歡迎211本科同學(xué)，過A區(qū)國家線，A區(qū)非偏遠(yuǎn)一本，交叉學(xué)科課題組
已經(jīng)有35人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 Abbkine亞科因 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 家人們 調(diào)劑不迷路 看這里 +8 | likeihood 2026-03-09 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料與化工 一志愿山大 321分 求調(diào)劑 +4 | 每天散步 2026-03-09 | 5/250 |
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +5 | Trying] 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 辛仁豆腐 2026-03-08 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)求調(diào)劑 +5 | 撲風(fēng)鈴的貓 2026-03-08 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 學(xué)碩 理工科均可 不區(qū)分研究方向 總分279求調(diào)劑 +9 | 1一11 2026-03-03 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料與化工，291分，求調(diào)劑 +13 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-04 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大能動(dòng)297求調(diào)劑，本科川大 +4 | 邵11 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 13853210211 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[教師之家] 交大前校長王樹國：現(xiàn)在最先進(jìn)的科技并不在大學(xué)實(shí)驗(yàn)室，而是在企業(yè)研究院 +4 | zju2000 2026-03-08 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)0856材料與化工，前三科206，總分283，求調(diào)劑 +7 | 26考研求調(diào)劑 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +10 | ounce. 2026-03-04 | 12/600 |
|
|
|
[考研]
 材料工程調(diào)劑
+6
|
zbcm_zbcm 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工282求調(diào)劑一志愿211 +5 | NA0912 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +4 | berdmond 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程 求調(diào)劑 +7 | xiiiia 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué) 280 一志愿太原理工 求調(diào)劑 +8 | 拾玖壹 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 347分電子信息專碩求調(diào)劑 +3 | 咕嘟咕嘟1 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +3 | Y?l?h 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 人間唯你是清歡 2026-03-03 | 4/200 |
|