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RNase H體外切割實(shí)驗(yàn)中RNA:DNA雜合雙鏈怎么制備?
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RNase H體外實(shí)驗(yàn)中RNA NA雜合雙鏈怎么制備才能做出好的效果圖,感謝,跪求,可有償咨詢RNase H催化降解RNA NA雜合雙鏈中RNA鏈的效果圖。使用RNase H,在20µl反應(yīng)體系(50mM Tris-HCl pH8.3, 75mM KCl, 3mM MgCl2, 10mM DTT)中,加入400ng RNA NA雜合雙鏈,以及圖中指定量的本產(chǎn)品或國外N公司的RNase H,37ºC孵育20分鐘進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)完畢后立即冰浴3-5分鐘并加入1μl 0.5M EDTA以終止反應(yīng)。取出5μl反應(yīng)液,加入1μl 6X DNA Loading Buffer (D0071),然后進(jìn)行15%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(180V電泳45分鐘)之后,用NA-Red (D0128/D0130) (1:2000稀釋)室溫染色7分鐘,隨后拍照觀察結(jié)果。 |
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