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RNase H體外切割實(shí)驗(yàn)中RNA:DNA雜合雙鏈怎么制備？
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RNase H體外實(shí)驗(yàn)中RNA NA雜合雙鏈怎么制備才能做出好的效果圖，感謝，跪求，可有償咨詢RNase H催化降解RNA NA雜合雙鏈中RNA鏈的效果圖。使用RNase H，在20µl反應(yīng)體系(50mM Tris-HCl pH8.3, 75mM KCl, 3mM MgCl2, 10mM DTT)中，加入400ng RNANA雜合雙鏈，以及圖中指定量的本產(chǎn)品或國(guó)外N公司的RNase H，37ºC孵育20分鐘進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)完畢后立即冰浴3-5分鐘并加入1μl 0.5M EDTA以終止反應(yīng)。取出5μl反應(yīng)液，加入1μl 6X DNA Loading Buffer (D0071)，然后進(jìn)行15%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(180V電泳45分鐘)之后，用NA-Red (D0128/D0130) (1:2000稀釋)室溫染色7分鐘，隨后拍照觀察結(jié)果。 |
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