 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1591 | 回復(fù): 0 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者子不語1977將贈(zèng)送您 5 個(gè)金幣 | |||
子不語1977新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
Crispr敲除擬南芥能在Basta篩選下長(zhǎng)出來但是靶點(diǎn)未被編輯
|
||
|
遇到的問題如題 使用的擬南芥是一個(gè)OE株系（Hyg抗性），一個(gè)雙突株系（無抗性），在這兩個(gè)基礎(chǔ)上分別轉(zhuǎn)入帶Basta抗性的crispr質(zhì)粒敲除基因。crispr質(zhì)粒是劉耀光院士實(shí)驗(yàn)室的PYLCRISPR/Cas9 Pubi-B質(zhì)粒。通過浸花法得到的種子差不多每一兩萬顆出一顆能在Basta篩選下生長(zhǎng)的陽性苗。跑設(shè)計(jì)在靶點(diǎn)附近上下游300bp引物獲得的PCR產(chǎn)物經(jīng)過測(cè)序發(fā)現(xiàn)靶點(diǎn)未被編輯。同時(shí)再用Basta篩選下生長(zhǎng)的陽性苗提的DNA去跑Cas9-F/R，有很弱的條帶，如圖（將Cas9-F/R引物輸入U(xiǎn)B質(zhì)粒圖譜，對(duì)應(yīng)產(chǎn)物大小為572bp） 請(qǐng)問我該如何解決靶點(diǎn)未被編輯的這個(gè)問題 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
可以準(zhǔn)確的通過filecode判斷基金中還是不中。
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
感覺普通人已經(jīng)沒辦法玩了，躺平是唯一的出路。
已經(jīng)有26人回復(fù)
-
植物學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有117人回復(fù)
-
江蘇省優(yōu)青門檻
已經(jīng)有20人回復(fù)
-
心好累。今年我們部門提交了18個(gè)項(xiàng)目。中了11了，可惜我的又掛了
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
面上項(xiàng)目計(jì)劃書
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
面上項(xiàng)目計(jì)劃書附件
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
面上項(xiàng)目計(jì)劃書系統(tǒng)狀態(tài)
已經(jīng)有18人回復(fù)
-
NSFC-UNEP（與聯(lián)合國(guó)環(huán)境規(guī)劃署）合作項(xiàng)目
已經(jīng)有33人回復(fù)
-
和伊朗人合作
已經(jīng)有32人回復(fù)
-
江蘇省自然基金
已經(jīng)有6人回復(fù)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 子不語1977 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué) 0703求調(diào)劑 總分293 一志愿211 +8 | 土土小蟲 2026-03-03 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600材料與化工 298 調(diào)劑 +7 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工求調(diào)劑！ +3 | 化工考生111 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +3 | 李LJR 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科太原理工采礦工程，求調(diào)劑 +3 | onlx 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304分材料專碩求調(diào)劑 +8 | qiuzhigril 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工，270求調(diào)劑 +14 | YXCT 2026-03-01 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +3 | thext 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料工程269求調(diào)劑 +7 | 白刺玫 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0854總分272 +5 | 打小就是老實(shí)人 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703 總分319求調(diào)劑 +4 | Xinyuu 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，化學(xué)專業(yè)344分，求調(diào)劑 +6 | 邢xing1 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿東北大學(xué)化學(xué)314分求調(diào)劑 +5 | lr1212.. 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 11408，學(xué)碩276求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +9 | 滿頭大汗的學(xué)生 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料284求調(diào)劑，一志愿鄭州大學(xué)英一數(shù)二專碩 +15 | 想上岸的土撥鼠 2026-02-28 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 哈工大計(jì)算機(jī)劉劼團(tuán)隊(duì)招生 +4 | hit_aiot 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料學(xué)碩298分，求調(diào)劑 +6 | wsl111 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +9 | 材料專碩調(diào)劑； 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研]
 尋找調(diào)劑
+4
|
LYidhsjabdj 2026-02-28 | 4/200 |
|