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2011218421新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
蛋白透析復(fù)性析出 已有3人參與
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就是包涵體蛋白進(jìn)行透析復(fù)性,復(fù)性液梯度是 6M 4M 2M 1M 0M,但是蛋白一到 2M 就析出,這是什么原因啊,也嘗試過(guò)加了 3M 依舊是 2M 的時(shí)候析出,用的是尿素溶解包涵體 @starseacow 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
至尊木蟲(chóng) (知名作家)
認(rèn)真就輸了
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包含體蛋白的純化,簡(jiǎn)直有點(diǎn)像玄學(xué)一樣的存在。雖然大腸桿菌的表達(dá)量會(huì)大很多,但是強(qiáng)烈建議如果為了純化活性蛋白的話,用昆蟲(chóng)細(xì)胞或者使用哺乳動(dòng)物細(xì)胞會(huì)好很多,尤其是如果表達(dá)分泌蛋白,其實(shí)從培養(yǎng)基上清里面純化這些分泌蛋白也挺方便的。如果你一定要用大腸桿菌的話,我建議你還是優(yōu)化誘導(dǎo)表達(dá)條件,讓他能夠慢慢的表達(dá)。再者就是可以給蛋白加一些比較大的那個(gè)標(biāo)簽,降低聚集的可能性。 發(fā)自小木蟲(chóng)手機(jī)客戶端 |

新蟲(chóng) (初入文壇)
| https://www.novopro.cn/tools/prot-sol.html可以用這個(gè)網(wǎng)站測(cè)一下可溶性,存在一種可能,你這個(gè)蛋白不可溶。。。。 |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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