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2011218421新蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白透析復性析出 已有3人參與
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就是包涵體蛋白進行透析復性，復性液梯度是 6M 4M 2M 1M 0M，但是蛋白一到 2M 就析出，這是什么原因啊，也嘗試過加了 3M 依舊是 2M 的時候析出，用的是尿素溶解包涵體 @starseacow 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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純咩咩咩
新蟲 (初入文壇)
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2樓2024-12-23 09:28:19
huanglyxm
至尊木蟲 (知名作家)
認真就輸了
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【答案】應(yīng)助回帖
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包含體蛋白的純化，簡直有點像玄學一樣的存在。雖然大腸桿菌的表達量會大很多，但是強烈建議如果為了純化活性蛋白的話，用昆蟲細胞或者使用哺乳動物細胞會好很多，尤其是如果表達分泌蛋白，其實從培養(yǎng)基上清里面純化這些分泌蛋白也挺方便的。如果你一定要用大腸桿菌的話，我建議你還是優(yōu)化誘導表達條件，讓他能夠慢慢的表達。再者就是可以給蛋白加一些比較大的那個標簽，降低聚集的可能性。 發(fā)自小木蟲手機客戶端 |
3樓2024-12-24 10:43:08
masterHT
鐵蟲 (初入文壇)
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4樓2025-02-13 14:26:20
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