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a85202金蟲 (小有名氣)
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[交流]
菌落PCR驗(yàn)證問題 已有1人參與
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各位蟲友好，最近菌落PCR驗(yàn)證遇到了奇怪的問題： 我在銅綠假單胞菌中電轉(zhuǎn)pherd20T質(zhì)粒，直接從轉(zhuǎn)化板上挑選單菌落，是可以驗(yàn)證出質(zhì)粒的條帶的，很清晰，這為第一次驗(yàn)證。 為了進(jìn)一步驗(yàn)證，我將第一次驗(yàn)證對的單菌落，再次通過加有抗生素的搖菌管進(jìn)行擴(kuò)大，之后再取菌液作為模板對電轉(zhuǎn)的質(zhì)粒進(jìn)行PCR驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)沒有擴(kuò)出質(zhì)粒中對應(yīng)的條帶，陰性對照和陽性對照沒有問題。 按理說，如果第一次是假陽性，那么擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)該不長，現(xiàn)在是PCR驗(yàn)證不出質(zhì)粒條帶，但是菌株又能夠在抗生素的培養(yǎng)基中正常生長，這是什么情況？ 不知道大家有沒有遇到類似的問題。 其他質(zhì)粒也出現(xiàn)過這種情況，很是費(fèi)解。 |
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2樓2024-07-25 14:45:30
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3樓2024-07-25 16:23:33
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