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a85202金蟲 (小有名氣)
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[交流]
菌落PCR驗證問題 已有1人參與
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各位蟲友好,最近菌落PCR驗證遇到了奇怪的問題: 我在銅綠假單胞菌中電轉(zhuǎn)pherd20T質(zhì)粒,直接從轉(zhuǎn)化板上挑選單菌落,是可以驗證出質(zhì)粒的條帶的,很清晰,這為第一次驗證。 為了進一步驗證,我將第一次驗證對的單菌落,再次通過加有抗生素的搖菌管進行擴大,之后再取菌液作為模板對電轉(zhuǎn)的質(zhì)粒進行PCR驗證,發(fā)現(xiàn)沒有擴出質(zhì)粒中對應的條帶,陰性對照和陽性對照沒有問題。 按理說,如果第一次是假陽性,那么擴大培養(yǎng)應該不長,現(xiàn)在是PCR驗證不出質(zhì)粒條帶,但是菌株又能夠在抗生素的培養(yǎng)基中正常生長,這是什么情況? 不知道大家有沒有遇到類似的問題。 其他質(zhì)粒也出現(xiàn)過這種情況,很是費解。 |
專家顧問 (正式寫手)
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