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求助大神！大腸桿菌高密度發(fā)酵問題。 已有5人參與
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希望做這方面的大佬幫我分析下大腸桿菌高密度發(fā)酵的問題。十分感謝！ 我遇到的主要問題是，發(fā)酵6-12h時間，取樣的菌體越來越容易沉降，發(fā)酵液味道越來越酸，且OD值后面就停滯不長了，發(fā)酵液色澤逐漸變成褐色，補料后的葡萄糖會被消耗，但是菌體濃度也不會長，好多個失敗的罐子OD值只到了20左右，我查了下資料，說是乙酸抑制了，還請大佬幫我分析分析，做了50個罐子了，成功了3個，嗚嗚嗚。 1. 配方是無機鹽類型，起始葡萄糖濃度是20g/L，我想問下，中途條件合適的情況下，糖耗完，OD值能長到多少？ 2. 發(fā)酵前期比生長速率怎么控制合適，每個小時的OD怎么變化呀？ 3. 我給的起始條件是通氣1：2，轉(zhuǎn)速400，中途升轉(zhuǎn)速至500，然后葡萄糖耗完時OD值為13左右，開始恒速流加補葡萄糖，2.5g/L/h。然后補著補著菌就不對了。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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5樓2024-07-25 15:17:53
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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| 很明顯發(fā)酵工藝是有問題的，一般發(fā)酵初始階段，通氣量0.5-1VVM，轉(zhuǎn)速100rpm就行了，設(shè)置溶氧聯(lián)動自動調(diào)節(jié)，調(diào)到500-600rpm就可以關(guān)掉聯(lián)動，等溶氧反彈后，再開始補料，像你說的這些問題，味道發(fā)酸，培養(yǎng)液基本上都是補進去的料液的顏色，菌體根本就沒消耗，都是菌體開始衰老死亡了，補料速率快了或者糖濃度高了一些，可以考慮改變補料方式，或者降低補料濃度，一般可以聯(lián)動補料或者指數(shù)補料， |
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ZZhepta2樓2024-07-24 16:45:57
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3樓2024-07-24 16:49:55
6樓2024-07-29 14:15:55
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