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ZZhepta新蟲 (初入文壇)
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[交流]
求助大神!大腸桿菌高密度發(fā)酵問題。 已有5人參與
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希望做這方面的大佬幫我分析下大腸桿菌高密度發(fā)酵的問題。十分感謝! 我遇到的主要問題是,發(fā)酵6-12h時(shí)間,取樣的菌體越來越容易沉降,發(fā)酵液味道越來越酸,且OD值后面就停滯不長(zhǎng)了,發(fā)酵液色澤逐漸變成褐色,補(bǔ)料后的葡萄糖會(huì)被消耗,但是菌體濃度也不會(huì)長(zhǎng),好多個(gè)失敗的罐子OD值只到了20左右,我查了下資料,說是乙酸抑制了,還請(qǐng)大佬幫我分析分析,做了50個(gè)罐子了,成功了3個(gè),嗚嗚嗚。 1. 配方是無機(jī)鹽類型,起始葡萄糖濃度是20g/L,我想問下,中途條件合適的情況下,糖耗完,OD值能長(zhǎng)到多少? 2. 發(fā)酵前期比生長(zhǎng)速率怎么控制合適,每個(gè)小時(shí)的OD怎么變化呀? 3. 我給的起始條件是通氣1:2,轉(zhuǎn)速400,中途升轉(zhuǎn)速至500,然后葡萄糖耗完時(shí)OD值為13左右,開始恒速流加補(bǔ)葡萄糖,2.5g/L/h。然后補(bǔ)著補(bǔ)著菌就不對(duì)了。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
鐵蟲 (初入文壇)
| 很明顯發(fā)酵工藝是有問題的,一般發(fā)酵初始階段,通氣量0.5-1VVM,轉(zhuǎn)速100rpm就行了,設(shè)置溶氧聯(lián)動(dòng)自動(dòng)調(diào)節(jié),調(diào)到500-600rpm就可以關(guān)掉聯(lián)動(dòng),等溶氧反彈后,再開始補(bǔ)料,像你說的這些問題,味道發(fā)酸,培養(yǎng)液基本上都是補(bǔ)進(jìn)去的料液的顏色,菌體根本就沒消耗,都是菌體開始衰老死亡了,補(bǔ)料速率快了或者糖濃度高了一些,可以考慮改變補(bǔ)料方式,或者降低補(bǔ)料濃度,一般可以聯(lián)動(dòng)補(bǔ)料或者指數(shù)補(bǔ)料, |
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