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wjny新蟲(chóng) (小有名氣)
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補(bǔ)料發(fā)酵方面的問(wèn)題 已有5人參與
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各位大佬，資料上都說(shuō)分批補(bǔ)料可提高產(chǎn)物濃度。關(guān)于產(chǎn)物抑制還有一些底物濃度過(guò)高的阻礙作用我也了解一些。 不過(guò)我想知道的是： 1.在補(bǔ)料的同時(shí)，可以給微生物提供更好的環(huán)境，產(chǎn)量提高沒(méi)什么問(wèn)題，但是發(fā)酵液的體積也會(huì)增加啊，發(fā)酵液中產(chǎn)物的濃度會(huì)升高嗎？如果補(bǔ)料培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基成分一樣的話，那這和一開(kāi)始就提高發(fā)酵培養(yǎng)基的體積是不是沒(méi)有什么區(qū)別？比如發(fā)酵液一開(kāi)始是5L，通過(guò)補(bǔ)料補(bǔ)到10L，和一開(kāi)始就接種到10L的發(fā)酵液中有很大的區(qū)別嗎？ 2.如果補(bǔ)一些易溶解成分比如單糖，那對(duì)培養(yǎng)基體積的影響不大，但是工業(yè)發(fā)酵上的成分可能溶解度并不很好，那就需要很多的水才能溶解，那采用液體補(bǔ)料的方式補(bǔ)這些成分對(duì)培養(yǎng)基的體積影響不是很大嗎？還是說(shuō)可以直接使用固體進(jìn)行補(bǔ)料？ 關(guān)于第一個(gè)問(wèn)題，我的想法是，一開(kāi)始的基地培養(yǎng)基是為了快速獲得大量的的菌體，而產(chǎn)物的發(fā)酵則是適合在一個(gè)營(yíng)養(yǎng)成分比較低的條件下進(jìn)行，補(bǔ)料的目的是為了維持這個(gè)較低營(yíng)養(yǎng)成分的條件。但是我仍然不明白那些難溶性成分比如淀粉之類(lèi)的是怎么進(jìn)行補(bǔ)料的？ 純學(xué)生，沒(méi)有了解過(guò)真正的生產(chǎn)實(shí)際情況，可能有些想當(dāng)然，還望各位大佬賜教，有具體例子的話最好。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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wjny: 金幣+5, ★★★很有幫助, 感謝回答，很有幫助 2024-07-23 11:14:41
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1、發(fā)酵的體積會(huì)隨著風(fēng)吹而減少的，最關(guān)鍵的是發(fā)酵的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)會(huì)隨著菌體生長(zhǎng)而消耗，且相比于搖瓶的高密度發(fā)酵在指數(shù)期后期，主消耗物很快就沒(méi)有了，所以補(bǔ)料是必需的。至于是補(bǔ)全料（與基礎(chǔ)料的配方一樣）還是只補(bǔ)主反應(yīng)物，是根據(jù)菌種代謝需要來(lái)的。一般補(bǔ)主反應(yīng)物的較多，因?yàn)橐话闱闆r下補(bǔ)全料會(huì)影響發(fā)酵產(chǎn)物的產(chǎn)生。 2、補(bǔ)主反應(yīng)物的話，濃度越高會(huì)越好一些，只要是實(shí)際機(jī)械、流動(dòng)性、活化、滅菌等工藝考量后的比較合適的濃度，因?yàn)榇_實(shí)會(huì)帶入水分，稀釋發(fā)酵液，增長(zhǎng)發(fā)酵體積。比如70-80%的糖液。 3、至于為什么很少見(jiàn)直接使用固體進(jìn)行補(bǔ)料，至少有滅菌與無(wú)菌操作方面的考慮。固體滅菌需要干熱的，溫度較高，如果是糖的話就變質(zhì)了，如果不滅菌會(huì)帶入大量的雜菌。再有豆粕之類(lèi)的，如果不活化、滅菌，還有帶入抑制生長(zhǎng)的物質(zhì)。 4、淀粉之類(lèi)一般配置成高濃度的淀粉溶液，再利用淀粉酶、糖化酶降解，經(jīng)過(guò)消毒后，當(dāng)糖化液補(bǔ)加。 |
3樓2024-07-23 08:11:12
7樓2024-07-26 11:44:25
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
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wjny: 金幣+2, ★有幫助, 感謝回答，算是做發(fā)酵抗生素之類(lèi)的吧 2024-07-23 11:02:54
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第一，微生物生長(zhǎng)好的環(huán)境， 一定是合適的條件才行，pH、鹽、碳源氮源濃度和比例。溫度、攪拌速度、罐壓等等，要研究的因素多了。 這也是為什么有發(fā)酵的基礎(chǔ)培養(yǎng)基濃度碳源比較低的原因。太高生長(zhǎng)不好唄。 第二，多看幾篇補(bǔ)料發(fā)酵的文章就會(huì)發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度低，補(bǔ)料培養(yǎng)基的濃度高很多。 你就明白為什么補(bǔ)料了。補(bǔ)料的種類(lèi)，碳氮比，流加速度等等，影響的是菌體生長(zhǎng)和目標(biāo)產(chǎn)物表達(dá)。 比如長(zhǎng)的快，不表達(dá)表達(dá)少。 發(fā)酵很難的，  沒(méi)做過(guò)還是多看幾篇文章。自己做的時(shí)候才會(huì)少犯錯(cuò)。你做什么發(fā)酵研究的？后續(xù)提純更難。 |
2樓2024-07-22 18:27:02
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6樓2024-07-23 17:52:42
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9樓2024-08-11 20:48:49
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感謝回答，我還想問(wèn)兩個(gè)問(wèn)題。 1. 單位od表達(dá)量應(yīng)該是相對(duì)菌體量來(lái)說(shuō)的吧，單位應(yīng)該是g/g（生物量），這相比于濃度g/L為什么更合適呢？ 2.在工業(yè)上對(duì)于培養(yǎng)基碳源氮源等成分的優(yōu)化中自然不需要太嚴(yán)格的要求，但是在科研論文時(shí)，單因素優(yōu)化的過(guò)程中，面對(duì)一些成分復(fù)雜的原料（特別是含碳的有機(jī)氮源），如果使用這些原料的話相當(dāng)于引入了多重變量，和單因素優(yōu)化的理念不符，但是我看很多論文都是這樣優(yōu)化的，這種影響是可以被忽略掉的嗎？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
10樓2024-08-11 21:02:48
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