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蛋白激酶胞內結構域原核表達純化 蛋白質出現(xiàn)在菌體沉淀中該怎么純化 已有1人參與
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蛋白原核表達不出來,有沒有什么辦法? 本人最近在做磷酸化實驗,目前在純化一個激酶,將kinase domain(跨膜結構域已去除)的序列構建到GST載體中,200ml培養(yǎng)基的菌體用50ml裂解液重懸破碎后離心,拷染發(fā)現(xiàn)蛋白質僅在菌體破碎后的沉淀中檢測到,在上清中檢測不到,用的是rosetta菌株,有沒有大神指導一下這種情況該怎么純化,非常感謝! 之前也用過pET-28a載體純化,也是同樣的情況。 |

銀蟲 (初入文壇)
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