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PCR實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
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影響pcr反應(yīng)的因素有哪些 1.模板純度，有較多蛋白或其他雜質(zhì)時(shí)，會(huì)一定程度影響pcr效率；2.模板量，過高的模板量反而會(huì)降低pcr效率和特異性；3.引物，引物的長度需要再效率和特異性間獲得優(yōu)化，其次要控制引物gc含量；4.聚合酶，要考慮酶的保真率和速度；5.mg離子濃度，mg離子濃度過高會(huì)降低特異性，濃度過低會(huì)降低效率；6.退火溫度：退火溫度低，效率會(huì)高，但特異性降低；退火溫度高，效率降低，但特異性會(huì)提高；需優(yōu)化。 PCR實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng) 1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實(shí)驗(yàn)室。 2、檢測(cè)設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實(shí)驗(yàn)室設(shè)置要求 熒光定量PCR儀+實(shí)時(shí)熒光定量試劑+通用電腦+自動(dòng)分析軟件，構(gòu)成PCR-DNA/RNA實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)。 3、必須通過國家臨床檢驗(yàn)中心的驗(yàn)收和認(rèn)證。 4、檢測(cè)人員必須通過國家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓(xùn)并取得合格證書;PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員必須參加由國家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗(yàn)中心舉辦的臨床基因擴(kuò)增培訓(xùn)班，并持證上崗。PCR實(shí)驗(yàn)室通過驗(yàn)收，實(shí)驗(yàn)室至少必須應(yīng)有兩個(gè)以上持有“臨床基因檢測(cè)上崗證”。 5、必須在無菌無塵環(huán)境下進(jìn)行操作PCR實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP）、建立系列質(zhì)量管理文件等，確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國家衛(wèi)生部的要求，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全，確保實(shí)驗(yàn)室長期穩(wěn)定運(yùn)行。 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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