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PCR實驗操作注意事項
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影響pcr反應(yīng)的因素有哪些 1.模板純度，有較多蛋白或其他雜質(zhì)時，會一定程度影響pcr效率；2.模板量，過高的模板量反而會降低pcr效率和特異性；3.引物，引物的長度需要再效率和特異性間獲得優(yōu)化，其次要控制引物gc含量；4.聚合酶，要考慮酶的保真率和速度；5.mg離子濃度，mg離子濃度過高會降低特異性，濃度過低會降低效率；6.退火溫度：退火溫度低，效率會高，但特異性降低；退火溫度高，效率降低，但特異性會提高；需優(yōu)化。 PCR實驗操作注意事項 1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室。 2、檢測設(shè)備必須符合標準PCR熒光實驗室設(shè)置要求 熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件，構(gòu)成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統(tǒng)。 3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認證。 4、檢測人員必須通過國家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓并取得合格證書;PCR實驗室內(nèi)工作人員必須參加由國家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗中心舉辦的臨床基因擴增培訓班，并持證上崗。PCR實驗室通過驗收，實驗室至少必須應(yīng)有兩個以上持有“臨床基因檢測上崗證”。 5、必須在無菌無塵環(huán)境下進行操作PCR實驗室必須建立嚴格的實驗室管理制度、建立標準化操作程序（SOP）、建立系列質(zhì)量管理文件等，確保實驗室日常運行符合國家衛(wèi)生部的要求，確保檢測結(jié)果準確、確保實驗室衛(wèi)生安全，確保實驗室長期穩(wěn)定運行。 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學、天然產(chǎn)物 |
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