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胚胎干細(xì)胞法的方法過程
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分離囊胚的內(nèi)細(xì)胞群（ICM）細(xì)胞，再進(jìn)行體外培養(yǎng)即可取得胚胎干細(xì)胞。目前，取得胚胎干細(xì)胞的方法已有一定改進(jìn)，但仍無(wú)可避免地會(huì)殺死胚胎。 囊胚由兩大部分構(gòu)成：處于外圍的滋養(yǎng)層以及處于內(nèi)部的內(nèi)細(xì)胞群。滋養(yǎng)層細(xì)胞會(huì)分化為胚胎外的組織（胎盤等），而內(nèi)細(xì)胞群則會(huì)分化為胚胎的各種結(jié)構(gòu)。 最早期分離胚胎干細(xì)胞的方法是先用蛋白酶分解透明帶的蛋白質(zhì)（囊胚外圍的一層細(xì)胞外基質(zhì)），再利用免疫手術(shù)（immunosurgery）專一地使滋養(yǎng)層細(xì)胞裂解，從而取得內(nèi)部的內(nèi)細(xì)胞群細(xì)胞，之后體外培養(yǎng)和繁殖取得的內(nèi)細(xì)胞群細(xì)胞，即可建立胚胎干細(xì)胞系。目前胚胎干細(xì)胞的分離方法已有了一定的改進(jìn)，比如現(xiàn)在已有使用激光去除透明帶的技術(shù)。 獲取胚胎干細(xì)胞的成功率相當(dāng)?shù)�，即使成功取得胚胎干�?xì)胞，維持其不分化的狀態(tài)也十分困難。為了阻止胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過程中分化，培養(yǎng)基需加入如白血病抑制因子（LIF）等因子。最初，胚胎干細(xì)胞需要在含有喂養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。喂養(yǎng)層細(xì)胞能為胚胎干細(xì)胞提供特定的微環(huán)境，以抑制胚胎干細(xì)胞的分化。喂養(yǎng)層細(xì)胞常常使用經(jīng)過有絲分裂阻斷劑（如絲裂霉素）處理過的胚胎成纖維細(xì)胞。目前已能在成分清楚、無(wú)異物、不含有血清以及喂養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞。 公眾號(hào)：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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