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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 細胞科學 » 胚胎干細胞法的方法過程
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胚胎干細胞法的方法過程
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分離囊胚的內(nèi)細胞群（ICM）細胞，再進行體外培養(yǎng)即可取得胚胎干細胞。目前，取得胚胎干細胞的方法已有一定改進，但仍無可避免地會殺死胚胎。 囊胚由兩大部分構成：處于外圍的滋養(yǎng)層以及處于內(nèi)部的內(nèi)細胞群。滋養(yǎng)層細胞會分化為胚胎外的組織（胎盤等），而內(nèi)細胞群則會分化為胚胎的各種結構。 最早期分離胚胎干細胞的方法是先用蛋白酶分解透明帶的蛋白質(zhì)（囊胚外圍的一層細胞外基質(zhì)），再利用免疫手術（immunosurgery）專一地使滋養(yǎng)層細胞裂解，從而取得內(nèi)部的內(nèi)細胞群細胞，之后體外培養(yǎng)和繁殖取得的內(nèi)細胞群細胞，即可建立胚胎干細胞系。目前胚胎干細胞的分離方法已有了一定的改進，比如現(xiàn)在已有使用激光去除透明帶的技術。 獲取胚胎干細胞的成功率相當?shù)�，即使成功取得胚胎干細胞，維持其不分化的狀態(tài)也十分困難。為了阻止胚胎干細胞在培養(yǎng)過程中分化，培養(yǎng)基需加入如白血病抑制因子（LIF）等因子。最初，胚胎干細胞需要在含有喂養(yǎng)層細胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。喂養(yǎng)層細胞能為胚胎干細胞提供特定的微環(huán)境，以抑制胚胎干細胞的分化。喂養(yǎng)層細胞常常使用經(jīng)過有絲分裂阻斷劑（如絲裂霉素）處理過的胚胎成纖維細胞。目前已能在成分清楚、無異物、不含有血清以及喂養(yǎng)層細胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)胚胎干細胞。 公眾號：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務內(nèi)容：分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關、生命科學、天然產(chǎn)物 |
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